Proliferative analysis of the Crandell-Rees Rim Feland cell (CRFK) grown with Dulbecco culture medium (DMEM) supplemented with B complex coenzymes

Authors

DOI:

https://doi.org/10.33448/rsd-v9i8.5573

Keywords:

Cell culture techniques; Citric acid cycle; Cyanocobalamin; Adenosine Triphosphate; Mitosis.

Abstract

The cell culture technique is used by all areas of science, mainly in Biotechnology, as it brings precise results and knowledge on new pathologies, studies on mechanisms of infections by microorganisms. The aim of this study was to analyze the proliferative potential of the Crandell-Rees Feline Kidney (CRFK) cell in static culture with Dulbecco culture medium (DMEM) supplemented with complex B coenzymes. This is a quantitative experimental study, divided into three groups: Control, Diverse and Diverse with B12, where the Control group did not receive extra concentration of coenzymes, the Diversas group received treatment with complex B coenzymes, which are: thiamine, riboflavin, niacin, pantathenic acid, pyridoxine, biotin and acid folic acid in four different concentrations, always doubling the concentration in the package insert of the DMEM culture medium, the third group received all seven coenzymes of the B complex plus cyanocobalamin (B12) that is not present in the package insert of DMEM. From this study it was concluded that the treatment with complex B coenzymes optimized the process of mitosis and subcultures time: in the Diverse group with B12 the culture time was 19.05 hours to reach the optimum point of confluence when compared Control group. Therefore, the study pointed out that coenzyme B12 is essential for cell metabolism, optimizing culture time by increasing the potential for cell mitosis.

Author Biographies

Fabiane da Silva Reis Góes, Unidade de Ensino Superior de Feira de Santana

Graduanda em Biomedicina do 9º período pela Unidade de Ensino Superior de Feira de Santana (UNEF). Iniciou no Hospital Geral Clériston Andrade (HGCA) no estágio supervisionado em Patologia Clínica, atuando nos setores de: Hematologia; Bioquímica; Bacteriologia, Urianálise e no setor de coleta para conclusão do curso técnico em Análises Clínicas. Foi membro ativa da Liga Acadêmica de Microbiologia Clínica- LAMC em 2018.2. Atualmente, realiza estágio curricular obrigatório em Imunologia (Imunobiológicos). Realiza pesquisa em cultura de células CRFK (Felis catus, cat). Faz iniciação científica sobre: Parasitologia Humana na comunidade atendida pela Clínica Escola de Odontologia da UNEF. É Diretora de projetos científicos da Liga Acadêmica de Pesquisa Científica (LAPEC). É monitora da disciplina de Imunologia Clínica.

Henrique Manoel Silva, Labovet Produtos veterinários

Especialista em Biologia Molecular

 Professor pesquisador no Labovet Produtos Veterinários

Ana Carolina Santana de Oliveira, Biomédica pela Universidade Federal do Triângulo Mineiro Mestrado e Doutorado pela Universidade Federal do Triângulo Mineiro

Possui graduação em Biomedicina pela Universidade Federal do Triângulo Mineiro (2003), mestrado e doutorado em Medicina Tropical e Infectologia (Área de Concentração - Imunologia e Parasitologia) pela Universidade Federal do Triângulo Mineiro (2006 e 2012). Tem experiência na área de Microbiologia, com ênfase em Microbiologia e em Imunologia, com ênfase em diagnóstico e imunidade inata. Atua na construção de testes diagnósticos para flavivírus. É membro do banco de docentes do INEP - Instituto Nacional de Estudos e Pesquisas Educacionais Anísio Teixeira como docente avaliador de autorização e reconhecimento de cursos de Graduação em Biomedicina.

References

Alberts, B, Johnson, A, Lewis, J, Morgan, D, Raff, M, Roberts, K & Hunt, T. (2017). Biologia molecular da célula. Artmed Editora.

Alves, E. A & Guimarães, A. C. R. (2010). Cultivo celular. EPSJV.

Bassoli, B. K. (2009). Ácido Fólico: efeitos paradoxais na promoção da hepatocarcinogênese em ratos. (Dissertação de mestrado), Universidade de São Paulo, São Paulo.

Barreto-Vieira, D. F, Barth, O. M, Silva, M. A. N. D, Santos, C. C, Santos, A. D. S & Filippis, A. M. B. D (2016). Ultraestrutura das partículas do vírus Zika em culturas celulares. Memórias do Instituto Oswaldo Cruz, 111 (8), 532-4.

Bretas, R. M. (2011). Avaliação da capacidade instalada para a produção e certificação de células animais. (Dissertação de mestrado), Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos, programa de pós-graduação em Tecnologia em Imunobiológicos, Rio de Janeiro.

Bousada, G. M & Pereira, E. L. (2017). Produção de vacinas virais parte I: engenharia de bioprocessos. Revista da Universidade Vale do Rio Verde, 15(1), 309-332.

Coleção Americana de Culturas e Tecidos – ATCC. Credible Leads to Incredible. 2017 disponível em: <https://www.atcc.org/en.aspx>

Crandell, R. A, Fabricant, C. G & Nelson-Rees, W. A. (1973). Desenvolvimento, caracterização e suscetibilidade viral de uma linha celular renal felina (Felis catus) (CRFK). In vitro, 9 (3), 176-85.

Cruz, M, Enes, M, Pereira, M, Dourado, M & Ribeiro, A. B. S. (2009). Modelos experimentais em oncologia: O contributo da cultura de células para o conhecimento da biologia do cancro. Revista portuguesa de pneumologia, 15(4), 669-82.

Devlin, T. M. (2007). Manual de Bioquímica com Correlações Clínicas. 6.ed. São Paulo: Edgard Blucher.

De Carvalho, A. C. A, Pereira, E. D. S. C, Costa, C, Barreto, I. C, Madureira, L. C & Paim, F. R. (2010). Estratégias regenerativas da bioengenharia tecidual e aspectos éticos. Revista de Ciências Médicas e Biológicas, 9(1), 20-27.

De Sousa Barbosa, B, Dos Santos, F. A, Pimentel, M. M. L, Fernandes, D. P, Prexedes, E. A & Bezerra, M. B. (2015). Histórico do desenvolvimento do cultivo de células animais. Uma Revisão. Revista Brasileira de Higiene e Sanidade Animal, 9(2), 334-47.

Do Amaral, J. B, & Machado-Santelli, G. M. (2011). A cultura de células em 3 dimensões e a sua aplicação em estudos relacionados a formação do lúmen. Naturalia, 34.

Toffalini, A. D. M. L. (2015). Avaliação de alternativas ao uso do soro fetal bovino na adaptação de cultivos celulares e obtenção e caracterização das células de córnea bovina (corbov).

Freshney, R. I. (2015). Culture of animal cells: a manual of basic technique and specialized applications. John Wiley & Sons.

Gomes, T. D. U. H. (2013). Efeito da concentração de metionina na dieta durante o período pré e pósnatal sobre o estresse oxidativo, a instabilidade genômica e expressão de RNAm de Mat1a, Bhmt e Cbs em camundongos (Doctoral dissertation, Universidade de São Paulo).

Isaac, C. (2012). Construção de substituto da pele composto por matriz de colágeno porcino povoada por fibroblastos dérmicos e queratinócitos humanos: avaliação histológica. Rev. Bras. Cir. Plást, 503-508.

Kennedy, D. O. (2016). B vitamins and the brain: mechanisms, dose and efficacy—a review. Nutrients, 8(2), 68.

Lara, M. T, Aguiar, M. J. B, Giannetti, J. G & Januário, J. N. (2014). Deficiência de biotinidase: aspectos clínicos, diagnósticos e triagem neonatal. Rev Med Minas Gerais, 24(3), 388-396.

Leme, J. (2016). Cultivo de célula BHK-21 C13 em meio de cultura livre de soro fetal bovino adaptada para crescimento em suspensão (Doctoral dissertation, Universidade de São Paulo).

Lents, N. H & Baldassare, J J (2016). Cyclins and Cyclin-Dependent Kinases. Encyclopedia of Cell Biology, volume 3, 423-432. https://doi.org/10.1016/B978-0-12-394447-4.30057-8

Martínez-Reyes, I, Diebold, L. P, Kong, H, Schieber, M, Huang, H, Hensley, C. T & Dufour, E. (2016). TCA cycle and mitochondrial membrane potential are necessary for diverse biological functions. Molecular cell, 61(2), 199-209.

Mccullough, L. E, Miller, E. E, Mendez, M. A, Murtha, A. P, Murphy, S. K & Hoyo, C. (2016) Vitaminas B maternas: efeitos no peso da prole e na metilação do DNA em domínios geneticamente impressos. Epigenética clínica, 8 (1), 8.

Migita, N. A. (2012). Cultivo celular in vitro: importância para a pesquisa biomédica e dimensão da problemática de autenticação de linhagens celulares. (Monografia) Universidade Estadual Paulista, Instituto de Biociências de Botucatu, Botucatu.

Montgomery, D. C. Design and analysis of experiments (2013). 8th ed. New York: John Wiley & Sons.

Monteiro, T. R, Luis, ZG, Freitas, E. D. O, Matsumoto, K & Scherwinski-Pereira, J. E. (2011). Diluição celular, características do meio de cultura e biorreatores de imersão temporária na diferenciação e regeneração de células em suspensão de bananeira. Revista Brasileira de Fruticultura, 33(SPE1), 213-221.

Nelson, D. L & Cox, M. M. (2018). Princípios de Bioquímica de Lehninger. 7ª ed. Editora Artmed.

Padmanabhan, N, Jia, D, Geary-Joo, C, Wu, X, Ferguson-Smith, A. C, Fung, E, Bieda, M. C, Snyder, F. F, Gravel, R. A, Cross, J. C & Watson, E. D (2013). A mutation in folate metabolism causes epigenetic instability and transgenerational effects on development. Cell, 155 (1), 81-93.

Paniz, C. (2015). Efeitos do ácido fólico não metabolizado na metilação global do DNA, na expressão de RNAm dos genes de DHFR, MTHFR, interferon-γ, TNF-αe interleucina-8, e na citotoxicidade das células NK (Doctoral dissertation, Universidade de São Paulo).

Pereira, A. S; Shitsuka, D. M; Parreira, F. J; Shitsuka, R. (2018). Metodologia da pesquisa científica. [e-book]. Santa Maria. Ed. UAB/NTE/UFSM. Disponível em: https://repositorio.ufsm.br/bitstream/handle/1/15824/Lic_Computacao_Metodologia-Pesquisa-Cientifica.pdf?sequence=1.

Rebello, M. A. (2014). Fundamentos da Cultura de Tecidos e Células animais. 1ª ed. Rio de Janeiro. Editora Rubio.

De Souza, F. G, Fernandes, B. L, Rebelatto, C. L. K., De Aguiar, A. M, Fracaro, L & Brofman, P. R. S. (2018). Proliferação e diferenciação de células‐tronco em contato com eluato de membrana de fibrina. Revista Brasileira de Ortopedia, 53(1), 45-52.

Schieferdecker, M. E. M, Thieme, R. D & Hauschild, D. B. (2015). Vitaminas, minerais e eletrólitos: aspectos fisiológicos, nutricionais e dietéticos. 1ª ed. Rio de Janeiro. Editora Rubio.

Torres, C. B. B & Pessoa, W. S. (2018). Células-tronco pluripotentes induzidas e edição de genes: avanços tecnológicos da pesquisa em medicina regenerativa e terapia gênica. Jornal Interdisciplinar de Biociências, 3(1), 56.

Ulak, M, Chandyo, R. K., Adhikari, R. K., Sharma, P. R., Sommerfelt, H, Refsum, H & Strand, T. A. (2014). Cobalamin and folate status in 6 to 35 months old children presenting with acute diarrhea in Bhaktapur, Nepal. PLoS One, 9(3).

Valdespino-Gómez, V. M, Valdespino-Castillo, P. M & Valdespino-Castillo, V. E. (2015). Interacción de las vías de senalización intracelulares participantes en la proliferación celular: potencial blanco de intervencionismo terapéutico. Cirugía y Cirujanos, 83(2), 165-174.

Vannucchi, H, Monteiro, T. M & Takeuchi, P. L. (2017). Cobalamina (vitamina B12). Brasil: ILSI – International Life Science Institute, 2.ed. São Paulo.

Voet, D, Voet, J. G & Pratt, C. W. (2014). Fundamentos de Bioquímica-: A Vida em Nível Molecular. Artmed Editora.

Yamamoto-Silva, F. P, Todescan, F. F, Duarte, R. C, De Araújo, N. S, Rosa, L, De Lima, K. L & de Freitas Silva, B. S. (2017). Estudo in vitro do padrão de crescimento e proliferação celular de pré-osteoblastos humanos com Bio-Oss® e GenO®. Revista Odontológica do Brasil Central, 26(76), 11-14.

Published

04/07/2020

How to Cite

GÓES, F. da S. R.; SILVA, H. M.; OLIVEIRA, A. C. S. de. Proliferative analysis of the Crandell-Rees Rim Feland cell (CRFK) grown with Dulbecco culture medium (DMEM) supplemented with B complex coenzymes. Research, Society and Development, [S. l.], v. 9, n. 8, p. e250985573, 2020. DOI: 10.33448/rsd-v9i8.5573. Disponível em: https://rsdjournal.org/index.php/rsd/article/view/5573. Acesso em: 12 nov. 2024.

Issue

Section

Health Sciences