Evaluación de la viabilidad espermática de semen de cabra criopreservado en medio ACP-101c y TRIS más yema de huevo Numida meleagris

Autores/as

DOI:

https://doi.org/10.33448/rsd-v10i14.22064

Palabras clave:

Cabra; Ensayo de cometas; Microscopía electrónica de transmisión; ACP®.

Resumen

Un medio diluyente ideal para la criopreservación seminal debe proporcionar a los espermatozoides energía, protección y mantenimiento de un entorno adecuado para la supervivencia de los espermatozoides. El objetivo de este estudio fue evaluar la integridad in vitro de semen de cabra criopreservado en medio ACP-101c® asociado a la yema de huevo de Numida meleagris, mediante das técnicas de análisis de espermatozoides individuales. Se recolectaron quince eyaculados de cinco cabras con la ayuda de una vagina artificial. Los eyaculados se recolectaron en un pool y se dividieron en 12 grupos, dos grupos de control: GC1 TRIS, con adición al 2.5% de la yema de huevo de Gallus gallus domesticus GOGD, GC2 ACP-101c®, con adición al 2.5% de la yema de huevo de Gallus gallus domesticus GOGD y diez grupos experimentales GE, que contienen la adición de la yema de huevo de Numida meleagris. Posteriormente, las alícuotas se llenaron en pajitas francesas de 0,25 mL y se congelaron con la ayuda del dispositivo TK3000® y se almacenaron en nitrógeno líquido. Las muestras se descongelaron después de siete días y se evaluó la integridad del ADN y su ultraestructura individual, utilizando la prueba del cometa y la microscopía electrónica de transmisión, respectivamente. En los resultados obtenidos por la prueba del cometa, no hubo diferencia estadística en la longitud de la cola entre los grupos TRIS más GONM, a concentraciones de 2.5%, 5% y 10% en comparación con el grupo control TRIS 2.5% de GOGD. Tampoco hubo diferencia estadística con respecto al porcentaje de fragmentación del ADN en la cola, en los grupos TRIS con 2.5%; 5%; y 20% de GONM en comparación con el grupo de control de TRIS 2,5% de GOGD (P> 0,05). Los grupos de ACP® con 10%, 15% y 20% de GONM tenían una mayor longitud de cola en comparación con los grupos de ACP® con 2,5% y 5% de GONM y el grupo de control (ACP® 2,5% de GOGD). En el análisis ultraestructural, el grupo ACP® con 10% de GONM se destacó con mejor integridad celular en comparación con los otros grupos, incluso en comparación con las muestras evaluadas del grupo control. Así, se concluye que la yema de huevo de Numida meleagris, como crioprotector de membrana externa, agregado a los extensores ACP-101c® o TRIS, puede reducir el daño causado durante el proceso de criopreservación de semen de cabra.

Citas

Alvarez-Suarez, J. M., Tulipani, S., Díaz, D., Estevez, Y., Romandini, S., Giampieri, F., Damiani, E., Astolfi, P., Bompadre, S., & Battino, M. (2011). Antioxidant and antimicrobial capcity of several monofloral Cuban honeys and their correlation with color, polyphenol content and other chemical compounds. Food and Chemical Toxicology. 48, 2490-2499.

Andrabi, S. M. S. (2007). Mammalian sperm cromatin structure and assessment of DNA fragmentation. Journal of assisted reproduction and genetcs. 24, 561-569.

Berkovitz, A., Eltes, F., Lederman, H., Peer, S., Ellenbogen, A., Feldberg, B., & Bartoov, B. (2006). How to improve IVF-ICSI outcome by sperm selection. Reproductive Biomedicine Online. 12, 5, 634–638.

Burgess, C. M., Bredl, J. C. S., Plummer, J. M., & Inglaterra, G. C. (2001). Vital and ultrastructural changes in dog spermatozoa during cryopreservation. J. Reprod. Fertil. 57, 357-363.

Brianezi, G. S., Camargo, J. L. V., & Miot, H. A. (2009). Desenvolvimento e validação de técnica quantitativa de análise de imagem para avaliação do teste do Cometa corado pela prata. Jornal Brasileiro de Patologia e Medicina Laboratorial. 45(4), 325-334.

Ciftci, H. B.; & Zulkadir, U. (2010). The correlation between bull sperm head dimensions and mitochondrial helix length. Journal of Animal and Veterinary Advances. 9(7), 1169-1172.

Colégio Brasileiro de Reprodução Animal, Manual de exame andrológico, 2° Ed, Belo Horizonte, Brasil, 2013.

Enciso, M., Cisale, H., Johnston, S. D., Sarasa, J., Fernandez, J. L., & Gosálvez, J. (2011). Major morphological sperm abnormalities in the bull are related to sperm DNA damage. Theriogenology. 76(1), 23-32.

Franco, J. G. Jr., Mauri, A .L., Petersen, C. G., Massaro, F.C., Silva, L. F. I., Felipe, V., Cavagna, M., Pontes, A., Baruffi, R. L. R., Oliveira, J. B. A., & Vagnini, L. D. (2011). Large nuclear vacuoles are indicative of abnormal chromatin packaging in human spermatozoa. International Journal of Andrology. 35(1), 46-51.

Garolla, A., Fortini, D., Menegazzo, M., De Toni, L., Nicoletti, V., Moretti, A., Selice, R., Engl, B., & Foresta, C. (2008). High-power microscopy for selecting spermatozoa for ICSI by physiological status. Reproductive Biomedicine Online. 17(5), 610–616.

Kacem, O., Sifer, C., Barraud-Lange, V., Ducot, B., De Ziegler, D., Poirot, C., & Wolf, J. (2010). Sperm nuclear vacuoles, as assessed by motile sperm organellar morphological examination, are mostly of acrosomal origin. Reproductive Biomedicine Online. 20, 132-7.

Lavolpe, M., Lorenzi, D., Greco, E., Nodar, F., & Sedó, C.A. (2015). Relationship Between Sperm DNA Fragmentation and Nuclear Vacuoles. JBRA Assisted Reproduction, 19(2), 70-74.

Moura, C. S., Nunes, A. K. S., Silva, B. S., Peixoto, C. A., Silva A. R., Silva, S. V., & Gerra, M. M .P. (2013). Efeito da temperatura de descongelação na integridade de espermatozoides criopreservados de cães. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia. 65, 4.

Park, S. Y., & Choi, J. (2007). Cytotoxicity, genotoxicity and ecotoxicity assay using human cell and environmental species for the screening of the risk from pollutant exposure. Environmental International. 33, 817-822.

Perdrix, A., Travers, A., Chelli, M .H., Escalier, D., Rego, J. L., Milazzo, J .P., Moussetsiméon, N., Macé, B., & Rives, N. (2011). Assessment of acrosome and nuclear abnormalities in human spermatozoa with large vacuoles. Human Reproduction. 26, 47-58.

Purdy, P. H. (2006). A review on goat sperm cryopreservation. Small Ruminant Ressearch. 63, 215-225.

Watt, B.; & Merrill, A. L. (1963). Composition of foods: raw, processed, prepared. Washington: Consumer and Food Economics Research Division. 198.

Zaia, M. G. Efeito da Mentha peperita L. durante a infecção experimental por Schistosoma mansoni. (2015). Dissertação (Mestrado em Genética Evolutiva e Biologia Molecular) 89 f. – Universidade Federal de São Carlos, São Carlos, 2015.

Qin, Y.; Yang, S.; Xu, J.; Xia, C.; Li, X.; An, L.; & Tian, J. (2018). Deep insemination with sex-sorted Cashmere goat sperm processed in the presence of antioxidants. Reproduction in domestic animals. 53(1), 11-19.

Rufino, M .S. M., Alves, R. E., Brito, E. S., Pérez-Jiménez, J., Saura-Calixto, F., & Mancini-Filho, J. (2010). Bioactive compounds and antioxidant capacities of 18 non-traditional tropical fruits from Brazil. Food Chemistry. 121, 996-1002.

Sakkas, D., Seli, E., Manicardi, G. C.; Nijs, M., Ombelet, W., & Bizzaro, D. (2004). The presence of abnormal spermatozoa in the ejaculate: did apoptosis fail. Humam Fertility. 7, 99-103.

Salgueiro, C. C. M., & Nunes, J. F. (2012). Água de coco em pó em biotécnicas da reprodução de caprinos. Ciência Animal. 22(1), 20-32.

Simões, R., Feitosa, W. B., Siqueira, A .F. P., Nichi, M., Paula-Lopes, F. F., Marques, M. G., Peres, M. A., Barnabe, V. H., Visintin, J. A., & Assumpçao, M. E. O. (2013). Influence of bovine sperm DNA fragmentation and oxidative stress on early embryo in vitro development outcome. Reproduction. 146, 433-441.

Silva, H. V. R., Nunes, T. G. P., Mota Filho, A. C., Pinto, J. N., Silva, A. R., & Silva, L .D. M. (2018). Adição de hidroxitolueno butilado (bht) no diluidor acp-106c para congelação de sêmen canino. Ciência Animal Brasileira. 19, 1-9.

Silva, M. A., Peixoto, G. C. X., Castelo, T.S., Lima, G.L., Silv, A.M., Oliveira, M.F., & Silva, A.R. 2013. Cryopreservation of collared peccary (Pecari tajacu) semen using different freezing curves, straw sizes, and thawing rates. Cryobiology. 67(1), 50-55.

Silva, S.V., & Guerra, M. M. P. (2011). Efeitos da criopreservação sobre as células espermáticas e alternativas para redução das crioinjúrias. Revista Brasileira de Reprodução Animal. 35, 370-384.

Publicado

01/11/2021

Cómo citar

MACÊDO, L. F. B. de .; TEIXEIRA, L. S. de A.; NASCIMENTO, W. M. .; BRAGA, C. de C. e .; PORFÍRIO, K. de P. .; SILVA, F. K. dos S. .; COSTA, S. C. da S. .; SILVA, L. H. M.; VIEIRA, R. J. .; SALGUEIRO, C. C. de M.; NUNES, J. F. .; BANDEIRA, N. S. A. .; AMARAL, F. P. de M. do; BEZERRA BARRADAS MINEIRO , A. L. .; CARDOSO, J. de F. S. .; PAULA, N. R. de O. . Evaluación de la viabilidad espermática de semen de cabra criopreservado en medio ACP-101c y TRIS más yema de huevo Numida meleagris. Research, Society and Development, [S. l.], v. 10, n. 14, p. e265101422064, 2021. DOI: 10.33448/rsd-v10i14.22064. Disponível em: https://rsdjournal.org/index.php/rsd/article/view/22064. Acesso em: 25 nov. 2024.

Número

Sección

Ciencias Agrarias y Biológicas