Determinación y validación del método analítico espectrofotométrico para la cuantificación de los flavonoides totales en las hojas de Azadirachta indica A. Juss. (Meliaceae) y optimización de las condiciones de extracción asistida por ultrasonidos
DOI:
https://doi.org/10.33448/rsd-v11i3.26135Palabras clave:
Neem; Control de calidad; Fitoterápico; Rutina.Resumen
Azadirachta indica A. Juss. (Meliaceae) es una planta cuyas hojas presentan diversas actividades farmacológicas, entre ellas: antioxidante, antimicrobiano e hipoglicemiante. El presente trabajo tiene como objetivo determinar y validar un método analítico espectrofotométrico para la cuantificación de flavonoides totales, expresados como rutina, en las hojas de A. indica y optimizar las condiciones de extracción de esos flavonoides. Para la selección del método espectrofotométrico se investigaron cuatro métodos analíticos. El método seleccionado como el más eficiente, simple, rápido y sostenible ha sido validado y optimizado. La validación se realizó según criterios de agencias reguladoras nacionales e internacionales. La planificación factorial Box Behnken (33) y la metodología de superficie de respuesta (MSR) se utilizaron para estimar las mejores condiciones de extracción. El método analítico que cumplió los criterios del estudio consistió en la extracción asistida por ultrasonido (EAU) del material vegetal en solución hidroetanólica, a una temperatura de 60 ºC, durante 30 minutos, seguida de filtración, dilución del extracto en solución de etanol/ácido acético 0,02 M (99:1) y lectura de las absorbancias en espectrofotómetro a 364 nm. En las etapas de la validación este método demostró ser lineal (intervalo lineal - 20 a 80 μg/mL), preciso (intradía e interdia), exacto (recuperación media de 120,8%), robusto y selectivo (ausencia de efecto matriz). Las mejores condiciones para el proceso de EAU fueron: Contenido etanólico 30% (p/p), proporción material vegetal/solvente 0,2 g/ml y tiempo de extracción 33 minutos. El método espectrofotométrico y las condiciones de EAU determinados en ese estudio están aptos para ser utilizados en el control de calidad de la droga vegetal y extractos etanólicos de las hojas de Azadirachta indica.
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