Análisis cuali-cuantitativo de ADN genómico extraído de hoja y estípite de x Butyagrus nabonnandii (Prosch.) Vorster

Resumen

Las herramientas de identificación de ADN son de gran importancia en los estudios genéticos de plantas, donde el aislamiento y la purificación son pasos cruciales. El objetivo del presente estudio fue probar la eficiencia de los métodos de conservación y maceración de muestras de hoja y estípite de x Butyagrus nabonnandii (Prosch.) Vorster en la extracción de ADN genómico. Los datos fueron analisados con el software Genes mediante análisis de varianza, considerando el esquema factorial 3x2x2x2 con tres repeticiones (tres ejemplares del híbrido; dos tipos de material biológico, estípite y hoja; dos tipos de conservación – fresco y deshidratado; dos tipos de maceración – con y sin nitrógeno líquido). Las medias se analizaron por el test de Tukey con 5% de probabilidad de error. El ADN genómico fue evaluado por espectrofotometria para determinar la concentración. La integridad se determinó por electroforesis en gel de agarosa. Se utilizaron dos iniciadores de la família de genes WRKY para comprobar la calidad del ADN obtenido en reacciones de PCR. Los análisis estadísticos revelaron diferencias significativas en las concentraciones de ADN entre los métodos evaluados. Se obtuvieron mayores cantidades de ADN en la extracción de hojas frescas en comparación con las hojas deshidratadas. El rendimiento de ADN  del estípite fresco y deshidratado no varió entre los métodos probados. Se puede prescindir del uso de nitrógeno líquido como resultado de los patrones de bandas en las reacciones de PCR. Fue posible extraer ADN de calidad y cantidades suficientes de material biológico de x B. nabonnandii, que amplificó las regions genómicas de interés.