Cuantificación de especies animales mediante PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) para verificar el fraude en productos cárnicos
DOI:
https://doi.org/10.33448/rsd-v12i1.38972Palabras clave:
qPCR en tiempo real; Validación; Carne de res y pollo; Miostatina.Resumen
El etiquetado de los alimentos es fundamental para evitar el consumo de un determinado tipo de carne por motivos religiosos y culturales, pero principalmente para evitar fraudes con el fin de obtener ventajas económicas. El método de qPCR en tiempo real se usa comúnmente para cuantificar el ADN en una muestra determinada mediante la cuantificación relativa (concentración de ADN diana específica sobre la concentración de ADN endógeno). En estudios que usan qPCR para cuantificar especies contaminantes, la normalización se realiza usando un gen de referencia de una sola copia, como la miostatina, presente en la mayoría de los mamíferos y aves. Este estudio tuvo como objetivo estandarizar la técnica de qPCR en tiempo real para obtener resultados cuantitativos relativos en carne de res manipulada. Para la estandarización del método, el límite de detección (LD) resultó en una señal de fluorescencia Cq de 36,80 ciclos en al menos 9 de 10 repeticiones (90%) a una concentración de 0,008% en caballo y Cq de 36,60 ciclos en al menos 7 de 10 repeticiones (70%) a una concentración de 0,0005% en pollo. La concentración más baja a la que la desviación estándar relativa (RSD) fue ≤25% estuvo entre 0,125% y 0,031% tanto para caballos como para pollos. Incluso usando curvas de cuantificación estándar que contenían 50 % de mezclas de carne o 100 % de carne objetivo pura, la pendiente de la curva, la eficiencia de amplificación y la correlación lineal estuvieron dentro de los criterios de aceptación recomendados. La prueba es sensible y una alternativa en la inspección de rutina de productos tanto para consumo humano como animal.
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