Caracterização fenotípica e genotípica de Staphylococcus aureus isolados de linguiça suína

Autores

DOI:

https://doi.org/10.33448/rsd-v10i2.12041

Palavras-chave:

Biofilme; Enterotoxinas; Meticilina; Saúde pública; Estresse subletal.

Resumo

O objetivo desse estudo foi caracterizar o genótipo e fenótipo de S. aureus isolados de linguiça suína. Cinquenta amostras de linguiça suína foram coletadas, foram realizadas contagens de Staphyloccus coagulase positiva e obtidos isolados para identificar a espécie S. aureus. Nos isolados, foi pesquisada a presença dos genes sea, seb, sec e sed, feita a avaliação da resistência a meticilina e testada a produção de biofilme em Ágar Vermelho Congo, aço inoxidável, polietileno, vidro e tripa suína. Também foi verificada a capacidade de alguns isolados formarem biofilme após a exposição a estresses subletais. Das amostras testadas, 12% apresentaram contagens acima do permitido pela legislação. S. aureus foi isolado de 44% das amostras. Destes, 54% possuíam apenas o gene sed e 32% possuíam os genes sec e sed, 73% foram classificados como S. aureus resistentes à meticilina (MRSA). Dos MRSA 62% possuíam apenas o gene sed e 35% possuíam ambos os genes encontrados no estudo. Quanto a formação de biofilme em ágar vermelho congo, 68% dos isolados de S. aureus foram considerados formadores de biofilme. Após serem submetidos aos estresses subletais, a maioria dos isolados formadores de biofilme continuou formando biofilme e os isolados não formadores de biofilme responderam de maneira distinta. A condição de estresse subletal que mais induziu a formação de biofilme foi o frio. A produção de biofilme foi observada apenas no aço inoxidável e na tripa suína em 71% e 57% dos isolados testados, respectivamente. Assim, ressalta-se a importância da implementação de boas práticas dentro da indústria para controlar a contaminação microbiana e a formação de biofilme.

Referências

Andretta, M. (2019). Serro artisanal cheese produced in Brazil has a microbial safety status for consumers. https://www.locus.ufv.br/bitstream/handle/123456789/25766/texto%20completo.pdf?sequence=1&isAllowed=y

Bauer, A. W., Kirby, W. M., Sherris, J. C. & Turch, M. (1966), Antibiotic susceptibility testing by a standardized single 457 disk method. American Journal of Clinical Pathology, 45 (4), 493-496.

Botelho, C. V. (2017). Staphylococcus coagulase positiva e Staphylococcus aureus resistentes a antibióticos em cadeia produtiva de carne suína. https://www.locus.ufv.br/bitstream/handle/123456789/18691/texto%20completo.pdf?sequence=1

Brasil - Ministério da Agricultura e do Abastecimento. (2017). Decreto nº 9.013, de 29 de março de 2017. Regulamento de inspeção industrial e sanitária de produtos de origem animal. https://www.gov.br/agricultura/pt-br/assuntos/aquicultura-e-pesca/legislacao/legislacao-geral-da-pesca/decreto-no-9-013-de-29-03-2017.pdf/view#:~:text=Regulamenta%20a%20Lei%20n%C2%BA%201.283,de%20produtos%20de%20origem%20animal

Brasil - Ministério da Agricultura e do Abastecimento. (2001). Resolução nº 12, de 02 de janeiro de 2001. Regulamento técnico sobre padrões microbiológicos para alimentos. http://portal.anvisa.gov.br/documents/33880/2568070/RDC_12_2001.pdf/15ffddf6-3767-4527-bfac-740a0400829b#:~:text=1%C2% BA%20Aprovar%20o%20REGULAMENTO%20T%C3%89CNICO,1977%2C%20e%20demais%20disposi%C3%A7%C3%B5es%20aplic%C3%A1veis

Carfora, V., Caprioli, A., Marri, N., Sagrafoli, D., Boselli, C., Giacinti, G., Giangolini, G., Sorbara, L., Dottarelli, S., Battisti, A. & Amastite, S. (2015). Enterotoxin genes, enterotoxin production, and methicillin resistance in Staphylococcus aureus isolated from milk and dairy products in Central Italy. International Dairy Journal, 42, 12-15.

Carmo, L. S., Dias, R. S., Linardi, V. R., Sena, M. J., Santos, D. A., Faria, M. E., Pena, E. C., Jett, M. & Heneine, L. G. (2002). Food poisoning due to enterotoxigenic strains of Staphylococcus present in Minas cheese and raw milk in Brazil. Food Microbiology, 19 (1), 9-14.

Chang, C. M., Chiang, M. L. & Chou, C.C. (2004). Responses of heat-shocked Vibrio parahaemolyticus to subsequent physical and chemical stresses. Journal of Food Protect, 67 (10), 2183-2188.

Chen, Q., Xie, S., Lou, X., Cheng, S., Liu, X., Zheng, W., Zheng, Z. & Wang, H. (2019). Biofilm formation and prevalence of adhesion genes among Staphylococcus aureus isolates from different food sources. Microbiology Open, 9 (1), 1-11.

CLSI - Clinical and Laboratory Standards Institute. (2019). Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing - Twenty Fourth Informational Supplement. https://clsi.org/media/2663/m100ed29_sample.pdf

Cunha, M. R. L. S., Calsolari, R. A. O. & Júnior, J. P. A. (2007). Detection of Enterotoxin and Toxic Shock Syndrome Toxin 1 Genes in Staphylococcus, with Emphasis on Coagulase Negative Staphylococci. Microbiology and Immunology, 51 (4), 381-390.

De Buyser, M. L., Dufour, B., Maire, M. & Lafarge, V. (2001). Implication of milk and milk products in food-borne diseases in France and in different industrialised countries. International Journal of Food Microbiology, 67 (1-2), 1-17.

Denayer, S., Delbrassinne, L., Nia, Y. & Botteldoorn, N. (2017). Food-borne outbreak investigation and molecular typing: high diversity of Staphylococcus aureus strains and importance of toxin detection. Toxins, 9 (12), 407.

Di Ciccio, P., Vergara, A., Festino, A. R., Paludi, D., Zanardi, E., Ghidini, S. & Lanieri, A. (2015). Biofilm formation by Staphylococcus aureus on food contact surfaces: Relationship with temperature and cell surface hydrophobicity. Food Control, 50, 930-936.

Donlan, R. M. & Costerton, J. M. (2002). Biofilms: survival mechanisms of clinically relevant microorganisms. Clinical Microbiology Reviews, 15 (2), 167-193.

El-Maghraby, M. S., Hassan, M. A., Hassanin, F. S. & Shawky, N. A. (2018). Detection of Enterotoxigenic Staphylococcus aureus in Meat Product Sandwiches Using Multiplex PCR. Benha Veterinary Medical Journal, 35 (1), 190-196.

Franco, B. D. G. M. & Landgraf, M. (2008), Microbiologia dos Alimentos. Atheneu.

Freeman, D. J., Falkiner, F. R. & Keane, C. T. (1989). New method for detecting slime production by coagulase-negative staphylococci. Journal Clinical Pathology, 42 (8), 872–874.

Friedriczewski, A. B., Gandra, E. Á., Da Conceição, R. C., Cereser, N. D., Moreira, L. M. & Timm, C.D. (2018). Biofilm Formation by Coagulase-Positive Staphylococcus aureus Isolated from Mozzarella Cheese Elaborated with Buffalo Milk and its Effect on Sensitivity to Sanitizers. Acta Scientiae Veterinariae, 46 (1), 6.

Galvão, N. N., Chiarini, E., Destro, M. T., Ferreira, M. A. & Nero, L. A. (2012). PFGE characterisation and adhesion ability of Listeria monocytogenes isolates obtained from bovine carcasses and beef processing facilities. Meat science, 92 (4), 635–643.

Germano, P. M. L., & Germano, M. I. S. (2015). Higiene e vigilância sanitária de alimentos. Manole.

Giaouris, E., Heir, E., Hébraud, M., Chorianopoulos, N., Langsrud, S., Moretro, T., Habimana, O., Desvaux, M., Renier, S. & Nychas, G. J. (2014). Attachment and biofilm formation by foodborne bacteria in meat processing environments: causes, implications, role of bacterial interactions and control by alternative novel methods. Meat Science, 97 (3), 298-309.

Goulart, A. R., Lacerda, I. C. A. & Dias, R. S. (2016). Potencial risco de intoxicação alimentar por Staphylococcus spp. enterotoxigênicos isolados de bolos com cobertura e recheio. NBC Periódico Científico do Núcleo de Biociências, 6 (11), 11-17.

Haaber, J., Cohn, M. T., Frees, D., Andersen, T. J. & Ingmer, H. (2012). Planktonic aggregates of Staphylococcus aureus protect against common antibiotics. Plos One, 7 (7).

Iñiguez-Moreno, M., Gutiérrez-Lomelí, M., Guerrero-Medina, P. J. & Avila-Novoa, M. G. (2018). Biofilm formation by Staphylococcus aureus and Salmonella spp. under mono and dual-species conditions and their sensitivity to cetrimonium bromide, peracetic acid and sodium hypochlorite. Brazilian Journal Microbiology, 49 (2), 310-319.

Jefferson, K. K. (2004). What drives bacteria to produce a biofilm? FEMS Microbiology Letters, 236 (2), 163-173.

Khan, F., Shukla, I., Rizvi, M., Mansoor, T. & Scharma, S. C. (2011). Detection of biofilm formation in Staphylococcus aureus. Does it have a role in treatment of MRSA infections. Trends in Medical Research, 6 (2), 116-123.

Kluytmans, J. A. J. W. (2010). Methicillin-resistant Staphylococcus aureus in food products: cause for concern or case for complacency?. Clinical Microbiology and infection, 16 (1), 11-15.

Lee, A., De Lencastre, H., Garau, J., Kluytmans, J., Malhotra-Kumar, S., Peschel, A. & Harbarth, S. (2018). Methicillin-resistant Staphylococcus aureus. Nature Reviews Disease Primers, 4 (1), 1-23.

Lee, J. S., Bae, Y. M., Lee, S. & Lee, S. Y. (2015). Biofilm formation of Staphylococcus aureus on various surfaces and their resistance to chlorine sanitizer”, Journal of food science, 80 (10), 2279- 2286.

Lianou, A. & Koutsoumanis, K. P. (2012). Strain variability of the biofilm-forming ability of Salmonella enterica under various environmental conditions. International Journal of food microbiology, 160 (2), 171–178.

Linhares, L. L., Yang, M., Sreevatsan, S., Munoz-Zanzi, C. A., Torremorell, M. & Davies, P. R. (2015). The effect of anatomic site and age on detection of Staphylococcus aureus in pigs. Journal of Veterinary Diagnostic Investigation, 27 (1), 55-60.

Lowy, F. D. (1998). Staphylococcus aureus infections. The New England Journal of Medicine, 339 (8), 520-532.

Marques, L. M. P. (2017). Caracterização fenotípica e genotípica de Staphylococcus aureus isolados de queijo minas frescal” https://app.uff.br/riuff/bitstream/1/3305/1/Marques%2c%20Leila%20M%c3%a1rcia%20Peres%20%5bDisserta%c3%a7%c3%a3o%2c%202014%5d.pdf

Milan, C., Agostinetto, A., Conceição, R. C. S., Gonzalez, H. L. & Timm, C.D. (2015). Sanitizer resistance of biofilm-forming Salmonella isolated from meat products. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, 67 (2), 642-646.

Oppliger, A., Moreillon, P., Charrière, N., Giddey, M., Morisset, D. & Sakwinska, O. (2012). Antimicrobial resistance of Staphylococcus aureus strains acquired by pig farmers from pigs. Applied and Environmental Microbiology, 78 (22), 8010-8014.

Ordóñez, J. A. (2005). Tecnologia de alimentos: Alimentos de Origem Animal. ArtMed.

Reiter, K. C., Da Silva, T. G., De Oliveira, C. F. & D’Azevedo, P. A. (2011). High biofilm production by invasive multiresistant staphylococci. Apmis, 119 (11), 776-781.

Robert, S. & Chambers, S. (2005). Diagnosis and management of Staphylococcus aureus infections of the skin and soft tissue. Internal Medicine Journal, 35, 97-105.

Rode, M. T., Langsrud, S., Holck, A. & Moretro, T. (2007). Different patterns of biofilm formation in Staphylococcus aureus under food-related stress conditions. International Journal of Food Microbiology, 116 (3), 372-383.

Rosa, J. V., Kaefer, K., Da Conceição, N. V. D., Da Conceição, R. C. S. & Timm, C. D. (2017). Formação de biofilme por Vibrio parahaemolyticus isolados de pescados. Pesquisa Veterinária Brasileira, 37 (4), 339-345.

Sambrook, J. & Russel, D. W. (2001). Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press.

Sankomkai, W., Boonyanugomol, W., Kraisriwattana, K., Nutchanon, J., Boonsam, K., Kaewbutra, S. & Wongboot, W. (2020). Characterisation of classical enterotoxins, virulence activity, and antibiotic susceptibility of Staphylococcus aureus isolated from Thai fermented pork sausages, clinical samples, and healthy carriers in northeastern Thailand. Journal of Veterinary Research, 64 (2), 289-297.

Santa, O. R. D., Alvarez, D. C., Santa, H. S. D., Zanette, C. M., De Freitas, R. J. S., De Macedo, R. E. F. & Terra, N. N. (2012). Microbiota of sausages obtained by spontaneous fermentation produced in the South of Brazil. Ciência e Tecnologia de Alimentos, 32 (4), 653-660.

Sasaki, T., Tsubakishita, S., Tanaka, Y., Sakusabe, A., Ohtsuka, M., Hirotaki, S., Kawakami, T., Fukata, T. & Hiramatsu, K. (2010). Multiplex‐PCR method for species identification of coagulase‐positive staphylococci. Journal of Clinical Microbiology, 48 (3), 765-769.

Savariraj, W. R., Ravindran, N. B., Kannan, P., Paramasivam, R., Senthilkumar, T. M. A., Kumarasamy, P. & Rao, V. A. (2019). Prevalence, antimicrobial susceptibility and virulence genes of Staphylococcus aureus isolated from pork meat in retail outlets in India. Journal of food safety, 39 (1).

Schmid, D., Fretz, R., Winter, P., Mann, M., Höger, G., Stöger, A., Ruppitsch, W., Ladstätter, J., Mayer, N., De Martin, A. & Allerberger, F. (2009). Outbreak of staphylococcal food intoxication after consumption of pasteurized milk products, June 2007, Austria. Wiener Klinische Wochenschrift, 121 (3-4), 125-131.

Shylaja, M., Goud, S. S. S., Samatha, K. & Pradeep, C. H. (2018). Studies on the incidence of Staphylococcus aureus and its enterotoxins in different meat and meat products. The Pharma Journal, 7 (4), 669-673.

Silva, J.R. (2019). Caracterização fenotípica de Staphylococcus aureus isolados de alimentos de origem animal e de outras fontes relacionadas. https://wp.ufpel.edu.br/ppgveterinaria/files/2019/09/Julia-Rosin-da-Silva.pdf

Smith, K., Perez, A., Ramage, G., Lapin, D., Gemmell, C. G. & Lang, S. (2008). Biofilm formation by Scottish clinical isolates of Staphylococcus aureus. Journal of Medical Microbiology, 57 (8), 1018-1023.

Song, J. W., Yang, S. J., Shin, S., Seo, K. S., Park, Y. H. & Park, K. T. (2016). Genotypic and phenotypic characterization of methicillin-resistant Staphylococcus aureus isolated from bovine mastitic milk in Korea. Journal of food protection, 79 (10), 1725-1732.

Strube, M. L., Hansen, J. E., Rasmussen, S. & Pedersen, K. (2018). A detailed investigation of the porcine skin and nose microbiome using universal and Staphylococcus specific primers. Scientific Reports, 8 (1), 1-9.

Tallent, S., Hait, J., Bennett, R. W. & Lancette, G. A. (2016). Staphylococcus aureus. In: U.S. Food and Drug Administration, Bacteriological analytical manual, chap. 12. https://www.fda.gov/food/laboratory-methods-food/bam-chapter-12-staphylococcus-aureus

Thapaliya, D., Forshey, B. M., Kadariya, J., Quick, M. G., Farina, S., O’Brien, A., Nair, R., Nworie, A., Hanson, B., Kates, A., Wardyn, S. & Smith, T. C. (2017). Prevalence and molecular characterization of Staphylococcus aureus in commercially available meat over a one-year period in Iowa, USA. Food microbiology, 65, 122-129.

Tutenel, A. V., Pierad, D., Hoff, J. V., Cornelis, M. & Zutter, L. D. (2003). Isolation and molecular characterization of Escherichia coli O157 isolated from cattle pigs and chickens at slaughter. International Journal of Food Microbiology, 84 (1), 63–69.

USDA - United States Department of Agriculture. (2019). Livestock and Poultry: World Markets and Trade. https://downloads.usda.library.cornell.edu/usda-esmis/files/73666448x/g445ct12h/ff365k146/Livestock_poultry.pdf

Valiatti, T. B., Barcelos, I. B., Calegari, G. M., Silva, W. M. C., Almeida, F. K. V., Dos Prazeres, P. F. L., Sobral, F. O. S., Romão, N. F. & Gasparotto, P. H. G. (2016). Avaliação microbiológica de linguiças tipo frescal comercializadas em supermercados do município de Ji-Paraná, Rondônia. Revista da Universidade do Vale do Rio Verde, 14 (2), 678-686.

Wong, H. C., Peng, P. Y., Han, J. M., Chang, C. Y. & Lan, S. L. (1998). Effect of mild acid treatment on the survival, enteropathogenicity, and protein production in Vibrio parahaemolyticus. Infection and Immunity, 66 (7), 3066-3071.

Zhang, Y., Xu, D., Shi, L., Cai, R., Li, C. & Yan, C. (2018). Association between agr type, virulence factors, biofilm formation and antibiotic resistance of Staphylococcus aureus isolates from pork production. Frontiers in microbiology, 9, 1876.

Downloads

Publicado

01/03/2021

Como Citar

KAEFER, K.; SILVEIRA, D. R. .; ROSA, J. F. .; GONÇALVES, T. G. .; MORAES, T. P. de .; TIMM, C. D. . Caracterização fenotípica e genotípica de Staphylococcus aureus isolados de linguiça suína. Research, Society and Development, [S. l.], v. 10, n. 2, p. e59910212041, 2021. DOI: 10.33448/rsd-v10i2.12041. Disponível em: https://rsdjournal.org/index.php/rsd/article/view/12041. Acesso em: 23 nov. 2024.

Edição

Seção

Ciências Agrárias e Biológicas