Protease com atividade fibrinolítica e colagenolítica produzida por Aspergillus ochraceus URM604

Autores

DOI:

https://doi.org/10.33448/rsd-v11i2.25500

Palavras-chave:

Resíduo de Café, Enzima Fibrinolítica, Fungo Filamentoso, Farelo de Trigo, Colagenase.

Resumo

Proteases possuem um papel fundamental na economia, estando presentes em diversos setores industriais. Dentre os fungos conhecidos por produzir proteases, destaca-se o gênero Aspergillus. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi produzir proteases a partir de fermentação em estado sólido de Aspergillus ochraceus, purificar, caracterizar e avaliar seu potencial na produção de enzima colagenolítica e fibrinolítica. Para isto foram avaliados o tipo e quantidade do substrato e a umidade das fermentações. Posteriormente foi realizada purificação por cromatografia DEA-Sephadex e Superdex-G75 em sistema FPLC. Assim como caracterização parcial avaliando o pH e temperatura ótimos da ação da protease. Foi observada que a melhor atividade da enzima nas fermentações com farelo de trigo como substrato (3g) e 60% de umidade, apresentando atividade proteásica, colagenolítica e fibrinolítica. Também foi observada maior atividade em pH8 e 50°C. Assim, concluísse que A. ochraceus possui grande potencial para aplicação biotecnológica, destacando-se a importância de futuras avaliações.

Referências

Ali, A. M. M.; & Bavisetty, S. C. B. (2020). Purification, physicochemical properties, and statistical optimization of fibrinolytic enzymes especially from fermented foods: A comprehensive review. International Journal of Biological Macromolecules, 163(20), 1498-1517.

Amaral, Y. M. S., Silva, A. O. S., Oliveira, R. L., & Porto, T. S. (2020). Production, extraction, and thermodynamics protease partitioning from Aspergillus tamarii Kita UCP1279 using PEG/sodium citrate aqueous two-phase systems. Preparative Biochemistry & Biotechnology, 1(20), 619-626.

Bhagwat, P. K & Dandge, P. B. (2018). Collagen and collagenolytic proteases: A review. Biocatalysis and Agricultural Biotechnology. 15 (18), 43–55.

Bianco, L. & Perrotta, G. (2015) Methodologies and perspectives of proteomics applied to filamentous fungi: From sample preparation to secretome analysis. International Journal of Molecular Sciences. 16 (3), 5803–5829.

Cerda, A., Mejías, L., Gea, T., & Sánchez, A. (2017). Cellulase and xylanase production at pilot scale by solid-state fermentation from coffee husk using specialized consortia: The consistency of the process and the microbial communities involved. Bioresource Technology. 243, 1059–1068.

Chavira, R. J.; Burnett, T. J.; & Hageman, J. H. (1984). Assaying proteinases with Azocoll. Annalytical Biochemistry. 136, 4446-4450.

Chilakamarry, C. R., Sakinah, A. M. M., Zularisam, A. W., Sirohi, R., Khilji, I. A., Ahmad, N., & Pandey, A. (2022) Advances in solid-state fermentation for bioconversion of agricultural wastes to value-added products: Opportunities and challenges. Bioresource Technology. 343(2022), 1-11.

Chimbekujwo, K. I., Ja’afaru, M. I., & Adeyemo, O. M. (2020). Purification, characterization and optimization conditions of protease produced by Aspergillus brasiliensis strain BCW2. Scientific African. 8 (20), 1-9.

Clerici, N. J., Lermen, A. M., & Freitas, D. J. D. (2021). Agro-industrial by-products as substrates for the production of bacterial protease and antioxidant hydrolysates. Biocatalysis and Agricultural Biotechnology. 37 (2021), 1-11.

El-Khonezy, M. Elgammal, E. W., Ahmed, E. F., & Abd-Elaziz, A. M. (2021) Detergentstable thiol-dependant alkaline protease produced from the endophytic fungus Aspergillus ochraceus BT21: Purification and kinetics. Biocatalysis and Agricultural Biotechnology. 35 (2021), 1-9.

Ginther, C. L. (1979). Sporulation and the Production of Serine Protease and Cephamycin C by Streptomyces lactamdurans. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 15, 522–526.

Gurumallesh, P., Alagu, K., Ramakrishnan, B., & Muthusamy, A.(2019). A systematic reconsideration on proteases. International Journal of Biological Macromolecules. 128, 254-257.

Naik, B., Goyala, S. K., Tripathi, A. D., & Kumarc, V. (2019). Screening of agro-industrial waste and physical factors for the optimum production of pullulanase in solid-state fermentation from endophytic Aspergillus sp. Biocatalysis and Agricultural Biotechnology. 22 (19), 1-7.

Nascimento, T. P. Sales, A. E., Porto, C. S., Brandão, R. M. P., Takaki, G. M. C., Teixeira, J. A. C., Porto, T. S., & Porto, A. L. F. (2015). Production and Characterization of New Fibrinolytic Protease from Mucor subtillissimus UCP 1262 in Solid-State Fermentation. Advances in Enzyme Research. 3 (3), 81–91.

Nascimento, T. P., . Sales, A. E., Porto, C. S., Brandão, R. M. P., Breydo, L., Uversky, V. N., Porto, A. L. F., & Converti, A. (2017). Purification, biochemical, and structural characterization of a novel fibrinolytic enzyme from Mucor subtilissimus UCP 1262. Bioprocess and Biosystems Engineering, 40(8), 1209–1219.

Novelli, P.K, Barros, M.M, & Fleuri, L.F. (2016). Novel inexpensive fungi proteases: Production by solid state fermentation and characterization, Food Chem. 198, 119–124.

Osmolovskiy, A. A., Popova, E. A., Kreyer, V. G., & Baranová, N. (2016). Fibrinolytic and collagenolytic activity of extracellular proteinases of the strains of micromycetes Aspergillus ochraceus L-1 and Aspergillus ustus 1. Moscow University Biological Sciences Bulletin. 71, 62–66.

Pandey, A., Soccol, C. R., Nigam, P., Brand, D., Mohan, R., & Roussos, S. (2000). Biotechnological potential of coffee pulp and coffee husk for bioprocesses. Biochemical Engineering Journal. 6(1), 153–162.

Pessoa-Jr, A. et al. Rompimento celular. In. Kilikian, B. V., & Pessoa-jr, A. (2020) Purificação de produtos biotecnológicos: operações e processos com aplicação industrial. 2ª ed. São Paulo: Blucher. 67-103.

Rocha, F. T. B., Brandão-costa, R. M. P., Neves, A. G. D., Cardoso, K. B. B., Nascimento, T. P., Albuquerque, W. W. C., & Porto, A. L. F. (2021) Purification and characterization of a protease from Aspergillus sydowii URM5774: Coffee ground residue for protease production by solid state fermentation. Microbiology • An. Acad. Bras. Ciênc. 93 (3), 1-13.

Smith, P.K.; Krohn, R.I.; Hermanson, G.T.; Mallia, A.K.; Gartner, F.H.; Provenzano, M.D.; Fujimoto, E.K.; Goeke, N.M.; Olson, B.J.; & Klenk, D.C. (1985). Measurement of protein using bicinchoninic acid. Analytical Biochemistry. 150 (1), 76-85.

Soccol, C. R.; Costa, E. S. F.; Letti, L. A. J.; Karp, S. G.; Woiciechowski, A. L.; & Vandenberghe, L. P. de S. (2017). Recent developments and innovations in solid state fermentation. Biotechnology Research and Innovation. 1, 52–71.

Tripathi, P., Tomar, R., & Jagannadham, M. V. (2011). Purification and biochemical characterization of a novel protease streblin. Food Chemistry, 125, 1005–1012.

Wanderley, M. C. A., Duarte, J. M. W., Filho, J. L. L., Lima, C. A., Teixeira, J. A. C., & Porto, A. L. F. (2017). Collagenolytic enzymes produced by fungi: a systematic review. Brazilian Journal of Microbiology. 48 (1), 1-13.

Wang, S. L., & Yeh, P.Y. (2006). Production of a surfactant-and solvent stable alkaliphilic protease by bioconversion of shrimp shell wastes fermented by Bacillus subtilis TKU007. Process Biochem 41, 1545–1552.

Downloads

Publicado

2022-01-22

Edição

Seção

Ciências da Saúde

Como Citar

Protease com atividade fibrinolítica e colagenolítica produzida por Aspergillus ochraceus URM604 . Research, Society and Development, [S. l.], v. 11, n. 2, p. e15511225500, 2022. DOI: 10.33448/rsd-v11i2.25500. Disponível em: https://rsdjournal.org/rsd/article/view/25500. Acesso em: 6 dez. 2025.