El tamoxifeno inhibe el canal aniónico inducido por la α-hemolisina de Staphylococcus aureus: análisis electrofisiológico y de acoplamento
DOI:
https://doi.org/10.33448/rsd-v10i2.12326Palabras clave:
Tamoxifeno; Staphylococcus aureus; Canal iónico; Factores virulentos; Agente antimicrobiano.Resumen
Investigar los efectos del tamoxifeno sobre el canal de α-hemolisina obtenido de Staphylococcus aureus (α-HL) en bicapas lipídicas planas con caracterización electrofisiológica y estudios de acoplamiento. Se prepararon membranas planas y se añadió α-HL (0,07mg/ml) a la solución estándar en la cámara cis de la cámara experimental. Todos los experimentos se llevaron a cabo a temperatura ambiente usando un amplificador Axopatch 200A en el modo de "sujeción de voltaje". A pH 7,5, los canales de α-HL estaban generalmente en alta conductancia ~4nS y rara vez cambian a estados de baja conductancia. Después de que el canal de iones se incorporó a la membrana, también se añadió tamoxifeno a la solución estándar en el compartimento cis. Para los estudios de acoplamiento, las coordenadas atómicas del canal heptamérico se obtuvieron del PDBID (7AHL) y la estructura del tamoxifeno de Pubchem, sus coordenadas se construyeron y minimizaron con el programa Avogadro. Los experimentos de acoplamiento molecular se llevaron a cabo utilizando el portal en línea Dockthor. El tamoxifeno inhibió (P<0,05) la conductancia del canal α-HL de forma dependiente del voltaje. Se evaluaron las tres mejores soluciones de atraque con el canal, se observó que el modo de conexión con mayor afinidad tiene mayor número de tipos de enlaces polares. Los residuos con las interacciones energéticas más altas fueron 111 y 147, que forman los residuos de la constricción del canal. Las otras conformaciones se acomodaron en una región con características más hidrofóbicas (valina 149). El mecanismo por el cual el tamoxifeno inhibió el canal de α-hemolisina de Staphylococcus aureus fue bloqueando la constricción de este canal.
Citas
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