Optimización de un método analítico HPLC-PDA para la monitorización terapéutica de busulfán oral en pacientes con trasplante de células madre hematopoyéticas

Resumen

Se optimizó un método para la monitorización plasmática de busulfán en pacientes sometidos a trasplante de células madre hematopoyéticas (TCMH). HPLC-PDA Shimadzu, columna C18 (150 mm x 4 mm), metanol/agua/acetonitrilo (65:20:15, v/v/v), se usó un flujo de 1 ml min-1; UV λ = 276 nm, tiempo de análisis 17 min; derivatización con dietilcarbamato de sodio, extracción con acetato de etilo; curva de calibración lineal de 200-5000 ng.mL-1. La recuperación relativa de los controles fue de 89% ± 0,04 (CQA = 86%; CQM = 87%; CQB = 93%) y la del EI (estándar interno) fue de 74% ± 0,47. La recuperación absoluta de los controles fue 114% ± 0.03 (CQA = 111%; CQM = 118%; CQB = 113%), y la del EI fue 102% ± 2.5. Los límites inferiores de cuantificación y detección obtenidos fueron, respectivamente, 200 ng.mL-1 y 40 ng.mL-1. La linealidad se analizó mediante la curva de calibración (200–5000 ng.mL-1) (r = 0,998). La repetibilidad (intra-análisis) fue de 1,25% -11,25% y la precisión intermedia (entre análisis), 2,17% -10,71%. La precisión encontrada fue de 89,61% -102,18%. La estabilidad a corto plazo de las muestras y soluciones extraídas fue de 6.25% y 3.18% para CQB, 7.54% y 2.4% para CQA y 13.17% y 4.13% para EI, respectivamente. La estabilidad de los ciclos de congelación y descongelación de las muestras y soluciones extraídas fue de 3.64% y 2.53% para CQB, 9.09% y 5.65% para CQA y 10.32% y 4.82% para EI, respectivamente. Así, fue posible validar una técnica para la determinación de busulfán en plasma por HPLC-PDA, adecuada para monitorización terapéutica de los pacientes.