El sexado como herramienta para la reinserción de los loros Amazona aestiva a la naturaleza: uso de técnica menos invasive

Autores/as

DOI:

https://doi.org/10.33448/rsd-v10i12.20601

Palabras clave:

CHD-Z/W; PCR; Sexaje molecular; Cebadores 2550F/2718R.

Resumen

El sexaje de aves es considerado una herramienta importante para estudios de comportamiento y programas de reintroducción de animales en el medio natural. Diversas técnicas son utilizadas para este fin, como la laparoscopia, la resonancia magnética y el sexaje molecular. Las primeras son consideradas más invasivas y estresantes para el animal y la última es considerada la más precisa. Ante el expuesto, el presente trabajo tuvo el objetivo de comparar la eficiencia del uso de tres conjuntos de primers en el proceso de sexaje molecular de loros verdaderos (Amazona aestiva). Así, se recogieron muestras sanguíneas de diez animales, en el Centro de Triage de Animales Silvestres (CETAS) del estado de Bahía, Brasil. El ADN fue extraído y los marcadores moleculares amplificados por Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), utilizando los pares de cebadores: P2/ P8, 1237/1272H y 2250F/2718R. Para la visualización del material amplificado se realizó electroforesis en geles de agarosa 2% y de poliacrilamida 12,5%. Entre los conjuntos de cebadores utilizados, el par 2250F/2718R presentó los mejores resultados para el sexaje, incluyendo la visualización de los productos amplificados en gel de agarosa. La electroforesis en gel de agarosa es considerada más rápida y menos costosa. Los resultados revelaron una composición muestral de 5 machos (0,5) y 5 hembras (0,5).

Citas

Ágh, N., Kovács, Sz., Nemesházi, E., & Szabó, K. (2018). Univerzális, ivarhatározáshoz használt CHD1 markerek alkalmazhatósága különböző madárrendekben. Magyar állatorvosok lapja, 140(1), 47-59.

Allgayer, M. D. C., & Cziulik, M. (2007). Reprodução de psitacídeos em cativeiro. Revista Brasileira de Reprodução Animal, 31(3), 344-350.

Baker, A. J., Piersma, T., & Greenslade, A. D. (1999). Molecular vs. phenotypic sexing in Red Knots. The Condor, 101(4), 887-893.

Bosnjak, J., Stevanov-Pavlovic, M., Vucicevic, M., Stevanovic, J., Simeunovic, P., Resanovic, R., & Stanimirovic, Z. (2013). Feasibility of non-invasive molecular method for sexing of parrots. Pakistan Journal Zoology, 45(3), 715-720.

Brasil. (2015). Instrução Normativa ICMBio nº 23, de 31 de dezembro de 2014. Define as diretrizes e os procedimentos para a destinação de animais silvestres apreendidos, resgatados por autoridade competente ou entregues voluntariamente pela população, bem como para o funcionamento dos Centros de Triagem de Animais Silvestres do IBAMA - CETAS. Diário Oficial da União, seção 1, Brasília, DF, 115-118, 02 jan. 2015.

Casey, A. E., Jones, K. L., Sandercock, B. K., & Wisely, S. M. (2009). Heteroduplex molecules cause sexing errors in a standard molecular protocol for avian sexing. Molecular Ecology Resources, 9(1), 61-65.

Dalfovo, M. S., Lana, R. A., & Silveira, A. (2008). Métodos quantitativos e qualitativos: um resgate teórico. Revista Interdisciplinar Científica Aplicada, 2(4), 01-13.

Dash, S. K., Kumarasamy, P., Malik, H. N., & Thiagarajan, V. (2013). Phylogenetic analysis of ratite bird emu (Dromaius novaehollandiae) using sex specific sequences. Indian Journal of Animal Research, 47(3), 247-250.

Dawson, D. A., Darby, S., Hunter, F. M., Krupa, A. P., Jones, I. L., & Burke, T. (2001). A critique of avian CHD‐based molecular sexing protocols illustrated by a Z‐chromosome polymorphism detected in auklets. Molecular Ecology Notes, 1(3), 201-204.

Del Puerto, F., Pésole, D., Molina, S., Vera, K., Arias, M., Sosa, J., Ortiz, M. L., Fernández, J., & Garay, A. (2017). Identificación molecular del sexo en 9 especies de aves del Centro de Investigación en Animales Silvestres de la hidroeléctrica de ITAIPU, lado paraguayo. Memorias del Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud, 15(3), 89-92.

Desjardins, P., & Conklin, D. (2010). NanoDrop microvolume quantitation of nucleic acids. Journal of visualized Experiments, 45, e2565.

Dos Remedios, N., Lee, P. L. M., Szekely, T., Dawson, D. A., & Kupper C. (2010). Molecular sex‐typing in shorebirds: a review of an essential method for research in evolution, ecology and conservation. Wader study group bulletin, 117(2), 109‐118.

Ellegren, H. (1996). First gene on the avian W chromosome (CHD) provides a tag for universal sexing of non-ratite birds. Proceedings of the Royal Society of London Series B, 263(1377), 1635-1641.

Franco-Gutiérrez, L. J., Álvarez-Cardona, J., & Soto-Calderón, I. D. (2017). Sex identification of neotropical macaws (Ara spp.) from invasive and non-invasive samples. Ornitología Colombiana, (16), eNB03, 01-07.

Freitas, A. C. P., Oviedo-Pastrana, M. E., Vilela, D. A. R., Pereira, P. L. L., Loureiro, L. O. C., Haddad, J. P. A., Martins, N. R. S., & Soares, D. F. M. (2015). Diagnóstico de animais ilegais recebidos no centro de triagem de animais silvestres de Belo Horizonte, Estado de Minas Gerais, no ano de 2011. Ciência Rural, 45(1), 163-170.

Fridolfsson, A-K., & Ellegren, H. (1999). A simple and universal method for molecular sexing of non-ratite birds. Journal of avian biology, 30(1), 116-121.

Griffiths, R., Daan, S., & Dijkstra, C. (1996). Sex identification in birds using two CHD genes. Proceedings of the Royal Society of London. Series B: Biological Sciences, 263, 1251-1256.

Griffiths, R., Double, M. C., Orr, K., & Dawson, R. J. G. (1998). A DNA test to sex most birds. Molecular ecology, 7(8), 1071-1075.

Gonçalves, B. P. (2013). Sexagem molecular em aves: contribuições para a conservação biológica e divulgação científica. Master’s thesis, Universidade Estadual Paulista, Botucatu, SP, Brasil. http://hdl.handle.net/11449/108613

Ibama. (2016). O que são CETAS? http://www.ibama.gov.br/fauna-silvestre/cetas/o-que-sao-os-cetas

Jensen, T., Pernasetti, F. M., & Durrant, B. (2003). Conditions for rapid sex determination in 47 avian species by PCR of genomic DNA from blood, shell-membrane blood vessels, and feathers. Zoo Biology, 22(6), 561-571.

Khan, N. W., St. John, J., & Quinn, T. W. (1998). Chromosome-specific intron size differences in the avian CHD gene provide an efficient method for sex identification in birds. The Auk, 115(4), 1074-1078.

Maheshkumar, G., Saravanan, R., Mani, K., & Murali, N. (2017). Molecular marker based sex identification in ratite and non-ratite type of birds: A comparative study. Indian Veterinary Journal, 94(5), 11-13.

Malaitad, T., Poeaim, S., & Eiamampai, K. (2015). Sex identification in barn swallows (Hirundo rustica Linnaeus) by molecular technique. Journal of Agricultural Technology, 11(8), 2411-2418.

Miyaki, C. Y., Griffiths, R., Orr, K., Nahum, L. A., Pereira, S. L., & Wanjtal, A. (1998). Sex identification of parrots, toucans, and curassows by PCR: perspectives for wild and captive population studies. Zoo Biology, 17(5), 415-423.

Monge, O., Dumas, D., & Baus, I. (2018). Environmental DNA from avian residual saliva in fruits and its potential uses in population genetics. Conservation Genetics Resources, 12, 131-139.

Morinha, F., Cabral, J. A., & Bastos, E. (2012). Molecular sexing of birds: A comparative review of polymerase chain reaction (PCR) -based methods. Theriogenology, 78(4), 703-714.

Ong, A. H. K., & Vellayan, S. (2008). An evaluation of CHD-Specific primer sets for sex typing of birds from feathers. Zoo Biology, 27(1), 62-69.

Pereira, D. C., Mirabal, B., França, A. M. M., Antonio, E. S., Fraga, R. E., & Tomazi, L. (2021). Sexagem molecular na formação de pares de arara-canindé (Ara ararauna) em programas de reintrodução. Research, Society and Development, 10(10), 570101019330.

Pereira, A. S., Shitsuka, D. M., Parreira, F. J., & Shitsuka R. (2018). Metodologia da pesquisa científica (1a ed.). [free e-book]. Santa Maria: Núcleo de Tecnologia Educacional da Universidade Federal de Santa Maria. https://repositorio.ufsm.br/handle/1/15824

Piacentini, V. Q., Aleixo, A., Agne, C. E., Maurício, G. N., Pacheco, J. F., Bravo, G. A., Brito, G. R. R., Naka, L. N., Olmos, F., Posso, S., Silveira, L. F., Betini, G.S., Carrano, E., Franz, I., Lees, A. C., Lima, L. M., Pioli, D., Schunck, F., Amaral, F. R., Bencke, G. A., Cohn-Haft, M., Figueiredo, L. F. A., Straube, F. C., & Cesari, E. (2015). Annotated checklist of the birds of Brazil by the Brazilian Ornithological Records Committee. Revista Brasileira de Ornitologia, 23(2), 91-298.

Renctas – Rede Nacional de Combate ao Tráfico de Animais Silvestres. Brasília. (2016). I Relatório Sobre Gestão e Uso Sustentável da Fauna Silvestre. http://www.renctas.org.br/i-relatorio-sobre-gestao-e-uso-sustentavel-da-fauna-silvestre/

Ribeiro, L. B., & Silva, M. G. (2007). O comércio ilegal põe em risco a diversidade das aves no Brasil. Ciencia e Cultura, 59(4), 4-5.

Sambrook, J., Fritsch, E. F., & Maniatis, T. (1989). Molecular cloning: a laboratory manual (Vol. 3, 2a ed.). New York: Cold Spring Harbor Laboratory Press.

Shizuka, D., & Lyon, B. E. (2008). Improving the reliability of molecular sexing of birds using a W-specific marker. Molecular Ecology Resources, 8(6), 1249-1253.

Silva, R. M. N., Figueiredo, P. O., & Santana, M. I. (2015). Development and distribution of the brachial plexus in Blue-fronted Parrot (Amazona aestiva, Linnaeus, 1758). Ciência Animal Brasileira, 16(3): 464-473.

Vieira, J. N. (2009). Sexagem molecular em aves via PCR: avaliação de três técnicas de extração de DNA. Master’s thesis, Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte, MG, Brasil. http://www.dominiopublico.gov.br/pesquisa/DetalheObraForm.do?select_action=&co_obra=135898

Vieira, J. N., Coelho, E. G. A., Teixeira, C. S., & Oliveira, D. A. A. (2012). PCR as a technique for molecular sexing in birds. Revista brasileira de Reprodução Animal, 36(3), 199-201.

Vucicevic, M., Stevanov‐Pavlovic, M., Stevanovic, J., Bosnjak, J., Gajic, B., Aleksic, N., & Stanimirovic, Z. (2012). Sex determination in 58 bird species and evaluation of CHD gene as a universal molecular marker in bird sexing. Zoo biology, 32(3), 269-276.

Wang, L., Chen, C., Lee, H., Li, S., Lir, J., Chin, S., Pu, C., & Wang, C. (2007). Sexing a wider range of avian species based on two CH3D1 introns with a unified reaction condition. Zoo Biology, 26(5), 425-431.

Descargas

Publicado

24/09/2021

Cómo citar

RAMOS, C. N.; BARROS, T. B. .; ANTONIO, E. S. de; MIRABAL, B.; SILVA, M. B. da; FRAGA, R. E.; TOMAZI, L. El sexado como herramienta para la reinserción de los loros Amazona aestiva a la naturaleza: uso de técnica menos invasive. Research, Society and Development, [S. l.], v. 10, n. 12, p. e380101220601, 2021. DOI: 10.33448/rsd-v10i12.20601. Disponível em: https://rsdjournal.org/index.php/rsd/article/view/20601. Acesso em: 27 jul. 2024.

Número

Sección

Ciencias Agrarias y Biológicas