Perfil da expressão dos mRNAs da família de proteínas PIWI em células humanas infectadas experimentalmente pelo Vírus Dengue 4
DOI:
https://doi.org/10.33448/rsd-v10i3.13371Palavras-chave:
PIWI; mRNA; Vírus Dengue; microRNA.Resumo
Objetivo: Avaliar a expressão dos RNAs mensageiros (mRNA) das proteínas PIWI durante a infecção por VDEN 4 em células de hepatócitos humano. Materiais e Métodos: Foi utilizada a cepa H778494 (JQ513335) do VDEN4 que se encontrava estocada em cultura de células Aedes albopictus (Clone C6/36) no acervo da seção de Arbovirologia e Febres Hemorrágicas do Instituto Evandro Chagas. As técnicas de cultivos celulares (C6/36, HepG2 e Huh7.5), estoque (C6/36), inoculação, extração, quantificação de carga viral, RTqPCR e análises estatísticas foram todas realizadas no Laboratório de Biogênese Viral da mesma seção. Resultados: De acordo com os resultados obtidos observou-se que duas células HepG2 e Huh7.5) demonstraram um maior nível de replicação viral a 72 horas pós infecção (hpi). O alvo PIWI 2 demonstrou que altera sua expressão de mRNA durante a infecção por VDEN4. Na expressão do alvo PIWI 4 foi observado uma expressão alterada nas células infectadas. Assim, verificou-se que os mesmos se encontram em polos diferentes, enquanto o titulo viral nos três primeiros dias apresentaram alta expressão, a expressão de mRNA foi baixa em relação a taxa normal dada pela amostra não infectada. Conclusão: Em nossos achados observou-se que as proteínas PIWI2 e 4 possuem uma relação inversa ao processo de infecção viral por VDEN4, isto é, quando ocorre um aumento da replicação viral essas duas proteínas acabam por ter uma redução significante de sua expressão. Estes dados acabam por nos levar a considerar que esta redução da expressão está envolvida com o processo de biogênese de microRNAs reguladores de apoptose.
Referências
Amorim, M. T., Ferreira, J. F. L., Luna, F. C. F. De, Franco Neto, W. F., Melo, K. F. L. De., Araújo, A. P. S., Borges, G. A. L., Casseb, S. M. M., Cruz, A. C. R., Holanda, G. M (2020). Estudo teórico-experimental comparativo aplicado à análise da expressão gênica de formas de DNA em células de artrópodes e de mamíferos infectadas experimentalmente pelo Vírus Dengue. Research, Society and Development, [S. l.], 9 (11), 94191110687.
Baillat, D., Shiekhattar, R (2009). Functional dissection of the human TNRC6 (GW182-related) family of proteins. Molecular and cellular biology, 29 (15), 4144–55.
Franz, A. W. E., Vargas, I. S., Adelman, Z. N., Blair, C. D., Beaty, B. J., James, A. A., Olson, K. E (2006). Engineering RNA interference-based resistance to dengue virus type 2 in genetically modified Aedes aegypti. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 14 (103), 4198-203.
Guzman MG, Halstead SB, Artsob H, et al (2010). Dengue: a continuing global threat. Nat Rev Microbiol. 8 (12): S7-16.
Hacisuleyman, E., Cabili, M. N., Rinn, J. L (2012). A Keystone for ncRNA. Genome Biology, 13 (5) 315-321.
Johnson, B. W., Russell, B. J., Lanciotti, R. S (2005). Serotype-Specific Detection of Dengue Viruses in a Fourplex Real-Time Reverse Transcriptase PCR Assay. Journal of Clinic Microbiology, 43 (10) 4977–4983.
Karapetyan, A. R., Buiting, C., Kuiper, R. A., Coolen, M. W (2013). Regulatory Roles for Long ncRNA and mRNA. Cancers, 5 (2) 462–490.
Livak, K. J.; Schmittgen, T. D (2001). Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and. Methods, 25, 402–408.
Umareddy, I. Pluquet, O., Wang, Q. I., Vasudevan, S. G (2007). Dengue virus serotype infection specifies the activation of the unfolded protein response. Virology journal, 4 (91), 167-176.
Van Bakel, H., Nislow, C., Blencowe, B. J., Hughues, T. R (2010). Most “dark matter” transcripts are associated with known genes. PLoS Biology, 8 (5).
Weaver, S. C, Reisen, W. K (2010). present and future arboviral threats, antivir., res., 85: 328-345.
Whitehorn, J.; Farrar, J (2010). Dengue. British Medical Bulletin, 95 (1) 161–173.
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