Desarrollo y estandarización de la prueba Dot Blot para el diagnóstico sorológico de la leptospirosis bovina
DOI:
https://doi.org/10.33448/rsd-v10i6.15091Palabras clave:
Dot-ELISA; Sensibilidad; Leptospira spp.; SAM; Inmunodiagnóstico.Resumen
La leptospirosis es una zoonosis endémica en Brasil y un problema de salud pública. Metodologías como Dot Blot, detener un papel importante porque es fácil de realizar, de bajo costo y sensibilidad. Se utilizaron proteínas de membrana externa (SMEs) de serovares Hardjo y Wolffi, para estandarizar una prueba Dot Blot para el serodiagnóstico de leptospirosis bovina. Fueron usados 96 muestras de suero bovino, previamente testeado en aglutinación microscópica de suero (SAM). Se evaluaron diferentes concentraciones de antígenos aplicados a membranas de nitrocelulosa, además de diferentes diluciones de suero bovino y conjugado, y la mejor distinción entre muestras positivas y negativas fue con 1µL de antígeno (0.11µg / µL de proteína de la membrana externa del serovar Hardjo (PMEH) y 0,08 μg / μL de proteína de la membrana externa del serovar de Wolffi (PMEW), bovino a una dilución de 1: 500 y conjugado a 1: 10000. Al evaluar el desempeño de la prueba Dot Blot se obtuvo una eficiencia del 71,87% y un índice kappa de 0,46 (p <0,0001), sensibilidad del 91,89%, especificidad del 59,32%, valor predictivo positivo del 58,62% y un valor predictivo negativo del 59,32%. Además, se identificaron otras ventajas, como la practicidad, bajo costo de dispensación de equipos sofisticados y de que las pymes de Hardjo y Wolffi también inducen una reacción con serovariedades de otros serogrupos patógenos. Los resultados arrojaron expectativas positivas para el uso de Dot Blot como soporte en el diagnóstico de leptospirosis bovina, especialmente si se utiliza como prueba de cribado, estimulando la continuidad de la investigación para que, en el futuro, se puedan desarrollar kits con fines diagnósticos.
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