Resistencia a carbapenémicos en cepas de Pseudomonas aeruginosa no productoras de carbapenemasas: la importancia del papel de OprD y AmpC
DOI:
https://doi.org/10.33448/rsd-v11i13.35164Palabras clave:
Pseudomonas aeruginosa; Carbapenémicos; Resistencia; OprD; AmpC.Resumen
La resistencia a los carbapenémicos es un desafío importante para la terapia antimicrobiana en infecciones causadas por Pseudomonas aeruginosa multirresistente, ya que reduce las opciones terapéuticas. Este estudio investigó los mecanismos de resistencia a los carbapenemes en seis cepas de P. aeruginosa no productoras de carbapenemasas. Las concentraciones inhibitorias mínimas para imipenem y meropenem se determinaron mediante prueba epsilométrica y microdilución en caldo. Las mutaciones en el gen oprD se investigaron mediante PCR y secuenciación. Los niveles transcripcionales de los genes oprD, ampC y eflujo se analizaron mediante RT-qPCR. La detección de la actividad de eflujo y AmpC se evaluó reduciendo la CIM en presencia de los inhibidores: PAβN y cloxacilina, respectivamente. Las cepas resistentes mostraron niveles moderados de resistencia a los carbapenémicos evaluados. La secuenciación del gen oprD reveló patrones de mutación similares en cepas del mismo Tipo de Secuencia -ST. Se detectó un codón de terminación prematuro solo en cepas resistentes de ST2236. Se encontraron mutaciones de inserciones y deleciones en el gen oprD de las cepas ST2237. La falta de detección de transcripciones de oprD por RT-qPCR confirma la ausencia de esta porina en las cepas ST2237. Las cepas ST2236 mostraron bajos niveles de transcripción para oprD. MexXY-OprM fue el único sistema de eflujo sobreexpresado en cepas resistentes. Sin embargo, no se detectó flujo de salida ni actividad de AmpC. Se encontraron altos niveles transcripcionales de ampC en el 50% de las cepas resistentes no inducidas. Todas las cepas resistentes inducidas por imipem mostraron un aumento en la expresión de ampC (>102 - 103 X). Se concluyó que la reducción y/o pérdida de OprD asociada a la sobreexpresión de AmpC es probablemente el principal mecanismo de resistencia a carbapenémicos en las cepas evaluadas.
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