Combinação de açúcares, lipoproteínas e centrifugação melhoram a viabilidade de espermatozoides de caprinos leiteiros pós-criopreservação
DOI:
https://doi.org/10.33448/rsd-v10i13.21559Palavras-chave:
congelação; Congelação; Fosfolipase A; fosfolipase A; mitocôndria; Mitocôndria; Plasma seminal.; plasma seminalResumo
O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos de diferentes crioprotetores e da centrifugação do sêmen sobre os parâmetros cinéticos e integridade da membrana do sêmen caprino criopreservado. Quatro bodes foram utilizados, e o sêmen foi colhido por meio de uma vagina artificial. Após colheita e aprovação do sêmen, seis pools foram formados, e cada pool foi dividido em oito alíquotas. O plasma foi retirado de quatro alíquotas por centrifugação (1200 g/10 min) e posteriormente diluído; as quatro alíquotas restantes foram diluídas em Tris-gema de ovo padrão, leite padrão, Tris-gema de ovo teste e diluente a base de leite, sem remoção do plasma seminal. Após a diluição, as amostras foram colocadas em palhetas (0,25 mL), congeladas e armazenadas a -196 °C. As amostras foram descongeladas (37 °C/30 s) e avaliadas imediatamente e duas horas pós-descongelação para determinar a cinética e integridade das membranas plasmática e mitocondrial. Foi observada diferença (p <0,05) na manutenção da cinética espermática, integridade da membrana plasmática e potencial mitocondrial entre os grupos centrifugados e não centrifugados e entre os extensores em diferentes momentos. Concluímos que o uso da centrifugação para remoção do plasma seminal afeta positivamente os parâmetros de avaliação do sêmen e que o extensor de gema é mais eficiente quando aplicado com diferentes técnicas de criopreservação, preservando as características desejáveis após a criopreservação do sêmen caprino.
Referências
Aboagla, E. M., & Terada, T. (2004). Effects of egg yolk during the freezing step of cryopreservation on the viability of goat spermatozoa. Theriogenology, 62(6), 1160–1172. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2004.01.013
Barbas, J. P., Leahy, T., Horta, A. E., & García-Herreros, M. (2018). Sperm kinematics and subpopulational responses during the cryopreservation process in caprine ejaculates. Cryobiology, 82, 137–147. https://doi.org/10.1016/j.cryobiol.2018.03.005
Bergeron, A., & Manjunath, P. (2006). New insights towards understanding the mechanisms of sperm protection by egg yolk and milk. Molecular Reproduction and Development, 73(10), 1338–1344. https://doi.org/10.1002/mrd.20565
Bergeron, A., Brindle, Y., Blondin, P., & Manjunath, P. (2007). Milk caseins decrease the binding of the major bovine seminal plasma proteins to sperm and prevent lipid loss from the sperm membrane during sperm storage. Biology of Reproduction, 77(1), 120–126. https://doi.org/10.1095/biolreprod.106.058248
Bispo, C. A. S., Pugliesi, G., Palhão, M. P., Coelho, P. G. B., Ker, P. G., Rodrigues, M. T., & Carvalho, G. R. (2011). Características in vitro e fertilidade do sêmen caprino armazenado a 5 °C por 24 horas utilizando duas concentrações de gema de ovo no diluente. Ciência Animal Brasileira, 12(4), 653–660. Recuperado de https://www.revistas.ufg.br/vet/article/view/13115
CBRA – Colégio Brasileiro de Reprodução Animal (2013). Manual para exame Andrológico e Avaliação de Sêmen Animal. Third ed. CBRA, Belo Horizonte. 46p.
Celeghini, E. C., de Arruda, R. P., de Andrade, A. F., Nascimento, J., Raphael, C. F., & Rodrigues, P. H. (2008). Effects that bovine sperm cryopreservation using two different extenders has on sperm membranes and chromatin. Animal Reproduction Science, 104(2-4), 119–131. https://doi.org/10.1016/j.anireprosci.2007.02.001
Cunha, A. T. M., Carvalho, J. O., & Dode, M. A. N. (2015) Techniques for sperm evaluation using fluorescent probes. Semina: Ciências Agrárias, 36, 4365-4376. http://dx.doi.org/10.5433/1679-0359.2015v36n6Supl2p4365.
Farias, C. F. A.; Tork, A. L. P.; Rique, A. S.; Queiróz, A. F.; & Silva. S. V. (2019) Estudo da eficácia da Aloe vera como crioprotetor vegetal na refrigeração de espermatozoides epididimários de bovinos. Revista Brasileira de Reprodução Animal, 43(3), 787-794. http://cbra.org.br/portal/downloads/publicacoes/rbra/v43/n3/p787-794%20(RB%20826).pdf
Graham, J. K., & Mocé, E. (2005). Fertility evaluation of frozen/thawed semen. Theriogenology, 64(3), 492–504. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2005.05.006
Hafez, E. S. E., Hafez, B. (2004) Reprodução Animal. Seventh ed. Manole, São Paulo.
Jiménez-Rabadán, P., Ramón, M., García-Álvarez, O., Maroto-Morales, A., Alvaro-García, P. J., Del Olmo, E., Pérez-Guzmán, M. D., Fernández-Santos, M. R., Julián Garde, J., & Soler, A. J. (2013). Improved cryopreservation protocol for Blanca-Celtibérica buck semen collected by electroejaculation. Cryobiology, 67(3), 251–257. https://doi.org/10.1016/j.cryobiol.2013.08.002
Luconi, M., Porazzi, I., Ferruzzi, P., Marchiani, S., Forti, G., & Baldi, E. (2005). Tyrosine phosphorylation of the a kinase anchoring protein 3 (AKAP3) and soluble adenylate cyclase are involved in the increase of human sperm motility by bicarbonate. Biology of Reproduction, 72(1), 22–32. https://doi.org/10.1095/biolreprod.104.032490
Manjunath, P., & Thérien, I. (2002). Role of seminal plasma phospholipid-binding proteins in sperm membrane lipid modification that occurs during capacitation. Journal of Reproductive Immunology, 53(1-2), 109–119. https://doi.org/10.1016/s0165-0378(01)00098-5
Martins, L. F., Pereira, M. C. B., Guimarães, J. D., Costa, E. P., Silveira, T. S., Torres, C. A. A., Rodrigues, M. T., & Braz, V. B. (2006) Avaliação espermática e da concentração de proteínas solúveis no plasma seminal de bodes da raça Alpina em regime de monta controlada. Revista Brasileira de Zootecnia, 35, 1653-1659. https://dx.doi.org/10.1590/S1516-35982006000600011
de Menezes, E. B., van Tilburg, M., Plante, G., de Oliveira, R. V., Moura, A. A., & Manjunath, P. (2016). Milk proteins interact with goat Binder of SPerm (BSP) proteins and decrease their binding to sperm. Cell and Tissue Research, 366(2), 427–442. https://doi.org/10.1007/s00441-016-2438-2
Mocé, E., Lozano-Palazón, S. A., Del Mar Martínez-Granell, M., Mocé, M. L., & Gómez, E. A. (2020). Effect of the Refrigeration System on In Vitro Quality and In Vivo Fertility of Goat Buck Sperm. Animals: an open access journal from MDPI, 10(12), 2399. https://doi.org/10.3390/ani10122399
Mortimer, S. T., Swan, M. A., & Mortimer, D. (1998). Effect of seminal plasma on capacitation and hyperactivation in human spermatozoa. Human Reproduction (Oxford, England), 13(8), 2139–2146. https://doi.org/10.1093/humrep/13.8.2139
Naing, S. W., Wahid, H., Mohd Azam, K., Rosnina, Y., Zuki, A. B., Kazhal, S., Bukar, M. M., Thein, M., Kyaw, T., & San, M. M. (2010). Effect of sugars on characteristics of Boer goat semen after cryopreservation. Animal Reproduction Science, 122(1-2), 23–28. https://doi.org/10.1016/j.anireprosci.2010.06.006
Pellicer-Rubio, M. T., Magallon, T., & Combarnous, Y. (1997). Deterioration of goat sperm viability in milk extenders is due to a bulbourethral 60-kilodalton glycoprotein with triglyceride lipase activity. Biology of Reproduction, 57(5), 1023–1031. https://doi.org/10.1095/biolreprod57.5.1023
Pellicer-Rubio, M. T., & Combarnous, Y. (1998). Deterioration of goat spermatozoa in skimmed milk-based extenders as a result of oleic acid released by the bulbourethral lipase BUSgp60. Journal of Reproduction and Fertility, 112(1), 95–105. https://doi.org/10.1530/jrf.0.1120095
Purdy, P. H. (2006) A review on goat sperm cryopreservation. Small Ruminant Research, 63, 215-225. https://doi.org/10.1016/j.smallrumres.2005.02.015.
Robertson, L., Wolf, D. P., & Tash, J. S. (1988). Temporal changes in motility parameters related to acrosomal status: identification and characterization of populations of hyperactivated human sperm. Biology of Reproduction, 39(4), 797–805. https://doi.org/10.1095/biolreprod39.4.797
Roof, D. J., Bowley, S., Price, L. L., & Matsas, D. J. (2012). Comparison of two commercial extenders for cryopreservation of goat semen without sperm washing. Theriogenology, 77(2), 412–420. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2011.08.015
Sariözkan, S., Bucak, M. N., Tuncer, P. B., Taşdemir, U., Kinet, H., & Ulutaş, P. A. (2010). Effects of different extenders and centrifugation/washing on postthaw microscopic-oxidative stress parameters and fertilizing ability of Angora buck sperm. Theriogenology, 73(3), 316–323. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2009.09.015
Soares, A. T., Silva, S. V., Batista, A. M., Almeida, F. C., Nunes, J. F., Peixoto, C. A., & Guerra, M. M. P. (2015). Ultrastructure evaluation of goat spermatozoa after freezing in a skim milk-based extender with Trolox supplementation. Andrologia, 47(4), 470–476. https://doi.org/10.1111/and.12279
Suarez, S. S., Varosi, S. M., & Dai, X. (1993). Intracellular calcium increases with hyperactivation in intact, moving hamster sperm and oscillates with the flagellar beat cycle. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 90(10), 4660–4664. https://doi.org/10.1073/pnas.90.10.4660
Suarez, S. S., Katz, D. F., Owen, D. H., Andrew, J. B., & Powell, R. L. (1991). Evidence for the function of hyperactivated motility in sperm. Biology of Reproduction, 44(2), 375–381. https://doi.org/10.1095/biolreprod44.2.375
Vidal, A. H., Batista, A. M., Silva, E. C. B., Gomes, W. A., Pelinca, M. A., Silva, S. V., Guerra, M. M. P. (2013) Soybean lecithin-based extender as an alternative for goat sperm cryopreservation. Small Ruminant Research, 109, 47–51. https://doi.org/10.1016/j.smallrumres.2012.07.022
Villemure, M., Lazure, C., & Manjunath, P. (2003). Isolation and characterization of gelatin-binding proteins from goat seminal plasma. Reproductive Biology and Endocrinology: RB&E, 1, 39. https://doi.org/10.1186/1477-7827-1-39
Verstegen, J., Iguer-Ouada, M., & Onclin, K. (2002). Computer assisted semen analyzers in andrology research and veterinary practice. Theriogenology, 57(1), 149–179. https://doi.org/10.1016/s0093-691x(01)00664-1
Downloads
Publicado
Como Citar
Edição
Seção
Licença
Copyright (c) 2021 Aline Francelina de Queiros; Camilla Flávia Avelino de Farias; Alex Souza Rique; André Luiz Pereira Tork; Carlos Augusto Alanis Clemente; Maria Madalena Pessoa Guerra; Sildivane Valcácia Silva
Este trabalho está licenciado sob uma licença Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Autores que publicam nesta revista concordam com os seguintes termos:
1) Autores mantém os direitos autorais e concedem à revista o direito de primeira publicação, com o trabalho simultaneamente licenciado sob a Licença Creative Commons Attribution que permite o compartilhamento do trabalho com reconhecimento da autoria e publicação inicial nesta revista.
2) Autores têm autorização para assumir contratos adicionais separadamente, para distribuição não-exclusiva da versão do trabalho publicada nesta revista (ex.: publicar em repositório institucional ou como capítulo de livro), com reconhecimento de autoria e publicação inicial nesta revista.
3) Autores têm permissão e são estimulados a publicar e distribuir seu trabalho online (ex.: em repositórios institucionais ou na sua página pessoal) a qualquer ponto antes ou durante o processo editorial, já que isso pode gerar alterações produtivas, bem como aumentar o impacto e a citação do trabalho publicado.