Avaliação da viabilidade espermática de sêmen caprino criopreservado em meio ACP-101c e TRIS acrescido de gema de ovo de Numida meleagris
DOI:
https://doi.org/10.33448/rsd-v10i14.22064Palavras-chave:
Bode; Teste cometa; Microscopia eletrônica de transmissão; ACP®.Resumo
Um meio diluente ideal para a criopreservação seminal deve suprir as células espermáticas com energia, proteção e manutenção de um ambiente adequado à sua sobrevivência. Objetivou-se avaliar a integridade in vitro do sêmen caprino criopreservado em meio ACP-101c® associado à gema de ovo de Numida meleagris, por meio de duas técnicas de análise individual da célula espermática. Foram colhidos 15 ejaculados de cinco caprinos, com auxílio de uma vagina artificial. Os ejaculados foram reunidos em um pool, e dividido em 12 grupos, sendo dois grupos controles: GC1 TRIS, com adição 2,5% da gema de ovo de Gallus gallus domesticus GOGD, GC2 ACP-101c®, com adição 2,5% da gema de ovo de Gallus gallus domesticus GOGD e dez grupos experimentais GE, contendo a adição da gema de ovo de Numida meleagris. Seguidamente, as alíquotas foram envasadas em palhetas francesas de 0,25 mL e congeladas com auxílio do aparelho TK3000® e armazenadas em nitrogênio líquido. Amostras foram descongeladas após sete dias e avaliadas quanto à integridade do DNA e quanto a sua ultraestrutura individual, por meio do teste cometa e microscopia eletrônica de transmissão, respectivamente. Nos resultados obtidos pelo teste cometa, não foi evidenciado diferença estatística quanto ao comprimento da cauda, entre os grupos TRIS acrescido de GONM, nas concentrações de 2,5%, 5% e 10% em relação ao grupo controle TRIS 2,5% de GOGD. Também não houve diferença estatística quanto ao percentual de fragmentação de DNA na cauda, nos grupos TRIS com 2,5%; 5%; e 20% de GONM em comparação ao grupo controle TRIS 2,5% GOGD (P>0,05). Os grupos ACP® com 10%, 15% e 20% de GONM apresentaram maior comprimento de cauda quando comparados aos grupos ACP com 2,5% e 5% de GONM e grupo controle (ACP® 2,5% de GOGD). Na análise ultraestrutural o grupo ACP® com 10% de GONM, destacou-se com melhor integridade celular frente aos demais grupos, inclusive, frente às amostras avaliadas do grupo controle. Dessa forma, conclui-se que a gema de ovo de Numida meleagris, como crioprotetor externo de membrana, acrescida aos diluentes ACP-101c® ou TRIS, pode reduzir os danos causados durante o processo de criopreservação do sêmen caprino.
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