Síntese de proteases por uma espécie de fungo filamentoso anamórfico para aplicação em processo industrial

Autores

DOI:

https://doi.org/10.33448/rsd-v11i16.38526

Palavras-chave:

Proteases; Fermentação submersa; Enzimas; Biotecnologia; Atividade proteolítica.

Resumo

O uso de enzimas no processamento de alimentos, detergente e no setor têxtil está em constante ascensão. A aplicação de enzimas proteolíticas de origem microbiana se destaca no setor industrial devido as condições desejáveis para uso em processos biotecnológicos, são biocatalisadores naturais e não tóxicos. O objetivo dessa pesquisa foi avaliar a produção e caracterizar as proteases sintetizadas por Aspergillus flavus. A cultura matriz foi preparada em ágar Sabouraud e mantida por sete dias a 25 ºC. Em seguida, a espécie foi cultivada em meio líquido [GYP (glicose, extrato de levedura e peptona)].  A fermentação foi conduzida em agitador orbital 150 rpm, 25 ºC. Após oito dias a massa micelial foi separada por filtração a vácuo em papel Whatman nº 1 e o extrato bruto recuperado, e filtrado em membrana polietersulfônica de 0,45μL. Para determinação da atividade das proteases foi utilizado como substrato azocaseína 1% (p/v) em tampão Tris-HCl pH 7.2.  Os resultados mostraram que A. flavus excretou proteases em todos nos meios testados, porém com atividade significativa no meio GYP (90,13 U/mL). As proteases apresentaram atividade ótima em pH 5 e temperatura 50ºC.  Esses resultados sugerem que essas enzimas podem ser utilizadas em diversos segmentos industriais, como alimentícia, têxtil e panificação.

Referências

Bano, S. et al. (2019). Characterization of crude protease produced by Pleurotus eryngii ATCC 90888. Pak. J. Biotechnol. 13, 193-198.

Barbosa, E. E. P., Pimenta, L., Brito, A. K.P., Martim, S. R. & Teixeira, M. F. S. (2020). Cultivo de cogumelo comestível em resíduos lignocelulósicos de floresta tropical para produção de proteases. Brazilian Journal of Development. 6(11), 92475-92485.

Braga, R. S. et al. (2020). Lentinus villosus Klotzsch (1833) AM 169: a natural and renewable source of alkaline protease. Braz. J. of Develop. 6(11), 85867-85883.

Brito, E. C. M., Braga, R. S., Teixeira, M. F. S. & Martim, S. R. (2019). Produção e caracterização parcial proteases aspárticas sintetizadas por Lentinus crinitus (L.) Fr.1825 DPUA 1693 (Polyporaceae). Bol. Mus. Para. Emílio Goeldi. Cienc. Nat., 14(3), 463-472.

Chimbekujwo, K. I., Já’ afaru, M. I. & Adeyemo, O. M. (2020). Purification, characterization and optimization conditions of protease produced by Aspergillus brasiliensis strain BCW2. Scientific African. 8(1).

Coelho, G. D., Sousa, J. P., Lima, C. A., & DA Silva Lins, S. A. (2018). Potencial de fungos da Caatinga para produção de enzimas amilolíticas. Revista Saúde & Ciência Online. 7(2), 286-297.

Damare, S., Mishra, A., D’souza ticlo diniz, D., Krishnaswamy, K. & Raghukumar, C. (2020). A deep sea hydrogen peroxide stable alkaline serine protease from Aspergillus favus. Biotech. 10(528).

Hawksworth, David L.& Lücking, R. (2017). Fungal diversity revisited: 2.2 to 3.8 million species. Microbiology spectrum, 5(4), 5-4.2017.

Inácio, f. d. et al. (2013). Produção de Protease e Lacase por Basidiomicetos. Biochemistry and Biotechnology Reports. Número Especial. 2(3), 359-362.

Liu, X., & Kokare, C. (2017). Microbial Enzymes of Use in Industry. Biotechnology of Microbial Enzymes. 267-298.

Neto, R. F., Silva, T. D., Abrão, F.O., Ferreira, J. C., Batista, L. H. C., Silva, B. C., Viera, R. I. M. & Miyage, E. S. (2020). Avaliação in vitro de fungos ruminais como probiótico para ovinos em dieta de alto grão. Brazilian Journal of Devolopment. 6(7), 53642-53656.

Omolehin, O., Raruang, Y., Hu, U., Han, Z.O., Wei, O., Wang, K., Rajasekaran, K., Cary, J.W. & Chen, Z. Y. (2021). Resistance to Aflatoxin Accumulation in Maize Mediated by Host-Induced Silencing of the Aspergillus flavus Alkaline Protease (alk) Gene. Journal of fungi. 7(904).

Osmolovskiy, A. A., Schmidt, L., Orekhova, A. V., Komarevtsev, S. K., Kreyer, V. G., Shabunin, S. V. & Egorov, N. S. (2021). Action of Extracellular Proteases of Aspergillus flavus and Aspergillus ochraceus Micromycetes on Plasma Hemostasis Proteins. Life. 11(782).

Naeem, M., Manzoor, S., Abid, M.-u.-H., Tareen, M. B. K., Asad, M., Mushtaq, S., Ehsan, N., Amna, D., Xu, B. & Hazafa, A. (2022). Fungal Proteases as Emerging Biocatalysts to Meet the Current Challenges and Recent Developments in Biomedical Therapies: An Updated Review. J. Fungi, 8(109).

Pimenta, L. Barbosa, E. E. P., Brito, A. P., Martim, S. R. & Teixeira, M. F. S. (2021). Processo eco-amigável para selecionar substrato Lignocelulósico para produção de peptidases ácidas. Brazilian Journal of Development. 7(1), 3469-3479.

Prado, F.B., Batista, S. C. B., Martim, S. R. & Teixeira, M. F.S. (2021). Viabilidade da produção de proteases por espécies de Aspergillaceae e triagem de coagulantes do leite bovino. Brazilian of Development. 7(2), 16356-16373.

Raper, K. B. & Fennell, D.I. (1977). “The Genus Aspergillus,” Krieger Publishing Company.

Salihi, A., Assodeh, A. & Aliabadian, M. (2017). Production and biochemical characterization of an alkaline protease from Aspergillusoryzae CH93. International Journal of Biological Macromolecules, 94, 827-835.

Santos, A. F., Gandra, M. R., Oliveira, S. S. C., Kneip, L. F., D’ávila- levy., C. M., Branquinha, M. H. & Santos, A. L.S. (2016). Peptidases em Biotecnologia: Produção, Aplicações e Mercado. Biotecnologia Aplicada à Agro&Indústria. Editora Edgard Blücher Ltda.

Silva neto, B. R. (2020). (Organizador). Micologia (recurso eletrônico): fungos e/ou seus metabólitos como objeto de estudo. Editora Atena. 64-96.

Teixeira, M.F.S., Silva, T.A., Palheta, R. A., Carneiro, A.L.B. & Atayde, H.M. (2011). Fungos da Amazônia: Uma riqueza inexplorada (Aplicações biotecnológicas). Manaus. Edua.

Vishwanatha, KS, Appu rao, AG & Singh, S.A. (2010). Produção e caracterização de uma enzima de coagulação do leite de Aspergillus oryzae MTCC 5341. Appl Microbiol Biotechnol 85, 1849–1859.

De vries, R.P., Riley, R., Wiebenga, A., Aguilar-osorio, G., Amillis, S., Uchima, C.A., Anderluh, G., Asadollahi, M., Askin, M. & Barry, K. (2017). Comparative genomics reveals high biological diversity and specific adaptations in the industrialy and medicaly important fungal genus Aspergillus. Genome Biol. 18(1), 1–45.

Zamani, E., Zargan, J., Honari, H., Hajizade, A., Mohammadi, A. H. N., Alikhani, H. K. & Pour, M. H. (2021). Immunological detection of AcAMP antimicrobial peptide secreted by Aspergillus clavatus. Iranian Journal of Microbiology, 13(2), 235.

Downloads

Publicado

17/12/2022

Como Citar

OLIVEIRA FILHO, D. C. de .; COELHO, K. W. dos S. A. .; COSTA, V. C. A. da .; PIMENTA, L.; BARBOSA, E. E. P. .; BRITO, A. K. P. de .; BATISTA, S. C. P. .; SANTANA, R. da S. .; CABRAL, T. S. .; TEIXEIRA, M. F. S. . Síntese de proteases por uma espécie de fungo filamentoso anamórfico para aplicação em processo industrial. Research, Society and Development, [S. l.], v. 11, n. 16, p. e548111638526, 2022. DOI: 10.33448/rsd-v11i16.38526. Disponível em: https://rsdjournal.org/index.php/rsd/article/view/38526. Acesso em: 19 maio. 2024.

Edição

Seção

Ciências Agrárias e Biológicas